基于骨再生应用的间充质干细胞比较及成骨分化相关IncRNAs筛选
发布时间：2021-07-07 13:52
骨是一种独特的具有自我修复和再生能力的器官,出生后的骨骼保留了其固有的在机械刺激下能够生长、改建以及在损伤后能够再生的能力。然而,如果出现严重创伤或全身性疾病、病理性骨折、骨和/或周围组织的感染或血液供应受损,骨组织可能会失去这种充分自愈的能力,这可能会导致永久性的骨缺损从而丧失相关部位的功能。此外,这种再生能力也会随着年龄的增长而下降,反映出来就是骨质疏松症,过去一个世纪医学的进步使得人们的平均寿命不断增长,与此同时,罹患骨质疏松的人数也相应的越来越多。而在口腔颌面部,先天畸形、创伤、肿瘤、炎症等所致的颌骨缺损不仅造成颜面畸形,还可能引起语言、咀嚼、呼吸等口腔功能的障碍,给患者在生理、心理方面都会带来许多不良影响。因此,对患者肌肉骨骼疾病的治疗一直受到临床医师的高度重视,而对新治疗方法的追寻也是临床研究者们一直的努力方向。组织工程学是一门从20世纪末期兴起的新兴学科,它是集生物工程、细胞生物学、分子生物学、材料学等于一体的交叉学科,为骨缺损的功能性修复与重建提出了一种新的思路,而随着组织工程与再生医学这一更大范畴理念的深入人心,通过体内或体外进行再生性治疗来恢复患者缺失的组织结构和功...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：183 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－２?７种ＭＳＣｓ的多向分化能力（Ａ）通过茜素红染色评估成骨分化
然后进入随后的对数期。四种口腔来源的ＭＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ具有相似的增殖速??率（／＞＞０．０５），并且分别从第５天和第３天开始细胞数显著多于ＢＭ－ＭＳＣｓ和ＡＤＳＣｓ??（ｐ＜０．〇５）（图１－３Ａ）。ＥｄＵ标记分析显示了类似的结果。在ＤＰＳＣｓ，ＰＤＬＳＣｓ，??ＧＭＳＣｓ，ＤＦＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ中观察到比在ＢＭ－ＭＳＣｓ和ＡＤＳＣｓ中更高比例的??ＥｄＵ阳性细胞（图１－３Ｂ、Ｃ），表明这五种ＭＳＣｓ具有更强的增殖能力。??Ａ?Ｂ??ＥｄｌＪ??Ｉ?ｌｏｃｃｈｓｔ?Ｍｅｒｇｅ??ｉｍ?＞ｉ、，、??？?ｄｉ＇ｓｃ??？??丨：３＾?－■■■??３…：、二卜１．．．人：；乂」「．?＇?＇?Ｍ?ｆ?二（．．??‘．、、＇？?、?、?、?、??＂”、＿．、、？、??ＡＤＳＴ、?Ｘ?？？：４?？？，：＆?＊？？：＆？？？：？＆?丨＇??ｃ?ＨＨＨ?ｌｉＨＨ?ＨＨＩＨｌ??１１?勹?ｈｍ－ｍｓｌ?ｓＭ?ｉ｜?｜?｜?ｊｐ?１?ｊ??１：］｜｜｜｜士圔：圔??＾?ＩＩＢＨＩＨＨ＾ＨｂＨＩ＇??图１－３不同ＭＳＣｓ增殖能力的比较（Ａ）?ＣＣＫ－８分析ＭＳＣｓ的生长动力学。（Ｂ）?ＥｄＵ??染色显示处于ＤＮＡ复制期的细胞。红色，ＥｄＵ阳性细胞核。蓝色，所有细胞核。??紫色
的Ｃａｓｐａｓｅ－９和ＢＡＸ表达较少，ＧＭＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ的Ｃａｓｐａｓｅ－９表达水平较高，??ＤＦＳＣｓ中，尽管Ｃａｓｐａｓｅ－９表达水平较低，但ＢＡＸ?／?Ｂｃｌ－２比率较高，并且抑凋??亡蛋白Ｃ－ＩＡＰ２和ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达水平在各种细胞中均为最低（图１－５）。??，ＺＶｃｖｃｖ’ＶｃＶ??丨ｍｍ??ｗ?：丨？?！觯浚犽s？??ｃ－ｉａｐ，??ｃ－ｉａｐ２??ｓｕｒ＇ｍｎ?Ｉｔ?麵曝■??￣???——?１＿??Ｃａｓｐａｓｃ－９??ＧＡＰＤＨ??图１－５促调亡与抗调亡蛋白的Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析??１．２．４细胞成骨分化能力的比较??为了研究源自不同组织的ＭＳＣｓ的成骨能力，我们在成骨诱导１４天时检测??了细胞的ＡＬＰ活性，２８天时检测了矿化结节的形成，并在１４天时检测了成骨??分化前中期相关蛋白Ｃ０Ｌ１和ＡＬＰ的表达，２８天时检测了成骨分化晚期标志蛋??白ＯＣＮ的表达情况。ＡＬＰ染色在ＰＤＬＳＣｓ，ＤＦＳＣｓ，?ＢＭ－ＭＳＣｓ和ＡＤＳＣｓ中更??深，其次是ＤＰＳＣｓ，而ＧＭＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ在第１４天染色较少（图１－６?Ａ）。通??过ＡＬＰ活性检测观察到相似的趋势
【参考文献】：
期刊论文
[1]Gingival-derived mesenchymal stem cells:An endless resource for regenerative dentistry[J]. Mohammed E Grawish. World Journal of Stem Cells. 2018(09)
[2]再谈干细胞的分类和分化潜能[J]. 冯汉茹. 中学生物教学. 2018(Z1)
[3]间充质干细胞治疗阿尔茨海默病的研究进展[J]. 张宇,杨萌萌,康红军. 解放军医学院学报. 2017(06)
[4]骨组织工程的研究进展和面临的问题[J]. 周晓,盛小伍,曾勇. 组织工程与重建外科杂志. 2016(05)
[5]应用干细胞疗法延缓小鼠亨廷顿氏病获得成功[J]. 生物医学工程与临床. 2016(04)
[6]0Adipose-derived stem cells: Implications in tissue regeneration[J]. Wakako Tsuji,J Peter Rubin,Kacey G Marra. World Journal of Stem Cells. 2014(03)
[7]人脐带和骨髓源间充质干细胞生物学特征的对比研究[J]. 吕璐璐,宋永平,魏旭东,房伯俊,张艳莉,李玉富. 中国实验血液学杂志. 2008(01)
[8]帕金森病发病机制研究进展[J]. 王岚,孙圣刚. 临床内科杂志. 2006(06)
[9]口腔颌面创伤的骨缺损修复[J]. 李仲影. 河北医药. 2002(05)
本文编号：3269750
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：183 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－２?７种ＭＳＣｓ的多向分化能力（Ａ）通过茜素红染色评估成骨分化
然后进入随后的对数期。四种口腔来源的ＭＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ具有相似的增殖速??率（／＞＞０．０５），并且分别从第５天和第３天开始细胞数显著多于ＢＭ－ＭＳＣｓ和ＡＤＳＣｓ??（ｐ＜０．〇５）（图１－３Ａ）。ＥｄＵ标记分析显示了类似的结果。在ＤＰＳＣｓ，ＰＤＬＳＣｓ，??ＧＭＳＣｓ，ＤＦＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ中观察到比在ＢＭ－ＭＳＣｓ和ＡＤＳＣｓ中更高比例的??ＥｄＵ阳性细胞（图１－３Ｂ、Ｃ），表明这五种ＭＳＣｓ具有更强的增殖能力。??Ａ?Ｂ??ＥｄｌＪ??Ｉ?ｌｏｃｃｈｓｔ?Ｍｅｒｇｅ??ｉｍ?＞ｉ、，、??？?ｄｉ＇ｓｃ??？??丨：３＾?－■■■??３…：、二卜１．．．人：；乂」「．?＇?＇?Ｍ?ｆ?二（．．??‘．、、＇？?、?、?、?、??＂”、＿．、、？、??ＡＤＳＴ、?Ｘ?？？：４?？？，：＆?＊？？：＆？？？：？＆?丨＇??ｃ?ＨＨＨ?ｌｉＨＨ?ＨＨＩＨｌ??１１?勹?ｈｍ－ｍｓｌ?ｓＭ?ｉ｜?｜?｜?ｊｐ?１?ｊ??１：］｜｜｜｜士圔：圔??＾?ＩＩＢＨＩＨＨ＾ＨｂＨＩ＇??图１－３不同ＭＳＣｓ增殖能力的比较（Ａ）?ＣＣＫ－８分析ＭＳＣｓ的生长动力学。（Ｂ）?ＥｄＵ??染色显示处于ＤＮＡ复制期的细胞。红色，ＥｄＵ阳性细胞核。蓝色，所有细胞核。??紫色
的Ｃａｓｐａｓｅ－９和ＢＡＸ表达较少，ＧＭＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ的Ｃａｓｐａｓｅ－９表达水平较高，??ＤＦＳＣｓ中，尽管Ｃａｓｐａｓｅ－９表达水平较低，但ＢＡＸ?／?Ｂｃｌ－２比率较高，并且抑凋??亡蛋白Ｃ－ＩＡＰ２和ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达水平在各种细胞中均为最低（图１－５）。??，ＺＶｃｖｃｖ’ＶｃＶ??丨ｍｍ??ｗ?：丨？?！觯浚犽s？??ｃ－ｉａｐ，??ｃ－ｉａｐ２??ｓｕｒ＇ｍｎ?Ｉｔ?麵曝■??￣???——?１＿??Ｃａｓｐａｓｃ－９??ＧＡＰＤＨ??图１－５促调亡与抗调亡蛋白的Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析??１．２．４细胞成骨分化能力的比较??为了研究源自不同组织的ＭＳＣｓ的成骨能力，我们在成骨诱导１４天时检测??了细胞的ＡＬＰ活性，２８天时检测了矿化结节的形成，并在１４天时检测了成骨??分化前中期相关蛋白Ｃ０Ｌ１和ＡＬＰ的表达，２８天时检测了成骨分化晚期标志蛋??白ＯＣＮ的表达情况。ＡＬＰ染色在ＰＤＬＳＣｓ，ＤＦＳＣｓ，?ＢＭ－ＭＳＣｓ和ＡＤＳＣｓ中更??深，其次是ＤＰＳＣｓ，而ＧＭＳＣｓ和ＵＣＭＳＣｓ在第１４天染色较少（图１－６?Ａ）。通??过ＡＬＰ活性检测观察到相似的趋势
【参考文献】：
期刊论文
[1]Gingival-derived mesenchymal stem cells:An endless resource for regenerative dentistry[J]. Mohammed E Grawish. World Journal of Stem Cells. 2018(09)
[2]再谈干细胞的分类和分化潜能[J]. 冯汉茹. 中学生物教学. 2018(Z1)
[3]间充质干细胞治疗阿尔茨海默病的研究进展[J]. 张宇,杨萌萌,康红军. 解放军医学院学报. 2017(06)
[4]骨组织工程的研究进展和面临的问题[J]. 周晓,盛小伍,曾勇. 组织工程与重建外科杂志. 2016(05)
[5]应用干细胞疗法延缓小鼠亨廷顿氏病获得成功[J]. 生物医学工程与临床. 2016(04)
[6]0Adipose-derived stem cells: Implications in tissue regeneration[J]. Wakako Tsuji,J Peter Rubin,Kacey G Marra. World Journal of Stem Cells. 2014(03)
[7]人脐带和骨髓源间充质干细胞生物学特征的对比研究[J]. 吕璐璐,宋永平,魏旭东,房伯俊,张艳莉,李玉富. 中国实验血液学杂志. 2008(01)
[8]帕金森病发病机制研究进展[J]. 王岚,孙圣刚. 临床内科杂志. 2006(06)
[9]口腔颌面创伤的骨缺损修复[J]. 李仲影. 河北医药. 2002(05)
本文编号：3269750
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