长非编码RNA调控肿瘤细胞耐药及衰老的机制研究

发布时间：2021-07-29 14:46

　　长非编码RNA在调节生命活动的过程中发挥了重要的功能,但其中的机制目前仍然不清楚。在本篇论文中,我们通过使用激活外源凋亡通路的TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL）和激活内源凋亡通路的UMI-77这两种药物,筛选得到了具有耐药性的黑色素瘤细胞株并在其中找到了差异表达的长非编码RNA。在之后的工作中,我们发现了一条在肿瘤中的高表达的长非编码RNA,卵巢癌高拷贝的长非编码RNA（OVAAL）,在多种肿瘤细胞的抗凋亡过程中均发挥了重要的功能。通过对临床样本的分析我们发现在结直肠癌和黑素瘤中OVAAL的表达水平显著高于正常组织。随后的功能实验表明,敲低OVAAL可以显著抑制肿瘤细胞的增殖及移植瘤的生长。机理部分,我们发现OVAAL与丝氨酸/苏氨酸-蛋白激酶3（STK3）结合,从而增强了 STK3和Raf-1之间的相互作用。OVAAL与STK3及Raf-1形成的三元复合物增强了 RAF/MEK/ERK通路的级联反应,从而促进了 c-Myc介导的细胞增殖和Mcl-1介导的细胞存活。另一方面,我们发现OVAAL和p27的mRNA与PTBP1之间存在竞争性结合,敲低OVAAL会引起PTBP1介导的p27... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图３．１?ＴＲＡＩＬ．?Ｓ与ＵＭＩ－ｎ．?Ｓ耐药细胞株的建立??图注：（Ａ）ＭＥ４４０５?ＴＲＡＩＬ－ｓｅｌｅｃｔｅｄ?（ＴＲＡＩＬ．?Ｓ）?ａｎｄ?ＭＥ４４０５?ＵＭＩ－７７?ｓｅｌｅｃｔｅｄ??（ＵＭＩ－７７．?Ｓ）亚细胞系使用?ＴＲＡＩＬ?（２５?ｎｇ?／?ｍｌ）或?Ｍｃｌ－１?抑制剂?ＵＭＩ－７７?（４?ＭＭ）??

Ｂ?ＭＥ４４０５?ＵＭ＾７７．Ｓ?ＭＥ４４０５?ＴＲＡＩＬＳ??图３．１?ＴＲＡＩＬ．?Ｓ与ＵＭＩ－ｎ．?Ｓ耐药细胞株的建立??图注：（Ａ）ＭＥ４４０５?ＴＲＡＩＬ－ｓｅｌｅｃｔｅｄ?（ＴＲＡＩＬ．?Ｓ）?ａｎｄ?ＭＥ４４０５?ＵＭＩ－７７?ｓｅｌｅｃｔｅｄ??（ＵＭＩ－７７．?Ｓ）亚细胞系使用?ＴＲＡＩＬ?（２５?ｎｇ?／?ｍｌ）或?Ｍｃｌ－１?抑制剂?ＵＭＩ－７７?（４?ＭＭ）??验证耐药抗性。⑴）药物处理后，用Ｃａｌｃｅｉｎ和ＥｔｈＤ－ｌ双染，绿色荧光代表活??细胞，红色荧光代表凋亡细胞。??选择ＭＥ４４０５黒色素瘤细胞是因为我们通过实验比较，在一组黑色素瘤细胞??系中ＭＥ４４０５对ＴＲＡＩＬ和ＵＭＩ－７７都比较敏感。??４３??

?＾?：＞?；Ｌ〇Ｃ１０５３７２２１８??ＬＯＣ１０５３７０４１３??０?ＭＥ４４０５?ＵＭＩ－７７，Ｓ?ＴＲＡＩＬＳ??图３．?２?ＴＲＡＩＬ．?Ｓ和ＵＭＩ－７７．?Ｓ细胞中上调的ＩｎｃＲＮＡ??图注：（Ｃ）耐药细胞与ＭＥ４４０５相比共有３７个ＩｎｃＲＮＡ共同上调。??匕调最显著的五个?ｌｉｕ．ＲＮＡ?中（ＯＶＡＡＬ，?ＰＵＫＡ２－ＡＳ１，ＬＯＣ１０?５３７２２１８，??Ｌ０Ｃ１０５３７０４１３和ＬＩＮＣ００２２１）只有敲低０ＶＡＡＬ时细胞对ＴＲＡＩＬ和ＵＭＩ－７７的抵抗??４４??


本文编号：3309523