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细胞极性蛋白Miranda通过控制Prospero的阈值性分布精确调控肠道干细胞数目

发布时间:2021-08-04 07:56
  目的:发育过程中的干细胞数目调控与组织稳态平衡、癌症、衰老等重大问题密切相关。果蝇肠道600个干细胞在蛹期先不对称分裂,后各自对称分裂,产生一对干细胞与一对内分泌细胞,出蛹前达到1200个干细胞。干细胞不对称分裂时,细胞极性蛋白Miranda(Mira)通过物理结合将内分泌细胞分化因子Prospero(Pros)定位到底部子代细胞中;而内分泌前体细胞对称分裂时,Mira消失,Pros平均分配到两个子代细胞。Mira决定细胞的分裂方式及其子代细胞的命运,因此Mira是决定干细胞数目的关键因子,我们通过在蛹期肠道干细胞谱系中过表达或敲除mira,来研究干细胞数目调控的分子机制。方法:(1)利用esgts在蛹期肠道干细胞中过表达Mira后统计肠道中干细胞及内分泌细胞数目;(2)通过Mira-GFP、Pros以及细胞极性蛋白Bazooka(Baz)的染色揭示过表达Mira表型的内在分子机制;(3)利用esgts在蛹期肠道干细胞中敲除mira后统计肠道中干细胞及内分泌细胞数目;(4)利用MARCM克隆技术对过表达和敲除mira时干细胞谱系进行追踪;(5... 

【文章来源】:华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:62 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

细胞极性蛋白Miranda通过控制Prospero的阈值性分布精确调控肠道干细胞数目


果蝇蛹期肠道干细胞的分裂模式

过表达,内分泌细胞,数目


华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文EWT MARCM UAS-Mira MARCM96hAPFF 96hAPFesgts>GFP esgts>UAS-MiraA BC D0.00.51.01.52.02.5****n.see36h APF60h APFTime transfer to 30℃GFP Pros GFP Prosesgts>GFPesgts>UAS-Miraesgts>GFP esgts>UAS-MiraISC/eeratioNumberofcelsISC0100020003000

均匀分布,细胞膜,蛹期,过表达


在对照组 esg-Gal4 中,ISC 不对称分裂时,Pros 分布于底部的细胞膜,Baz 定位于顶部的细胞膜(图 3F 和 F’),EMC 对称分裂时,Pros 均匀分布于细胞质中,Baz也定位于顶部的细胞膜(图3G和G’)。而在实验组esg>UAS-MiraGFP中,2nd 不对称分裂时,MiraGFP 和 Pros 都分布于底部的细胞膜上,Baz 定位于顶部的细胞膜(图 3H 和 H’),但 3rd 对称分裂时,MiraGFP 和 Pros 都均匀分布于细胞质中,Baz 定位到整个细胞膜上(图 3I 和 I’)。这一结果表明,由于 Baz定位错误


本文编号:3321325

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