噪音刺激对大鼠心交感神经功能的影响及其机制研究
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【摘要】:研究背景和目的:随着生物医学模式向生理-心理-社会医学模式的转变,心理应激在疾病发生、发展中的作用越来越受到关注。人类的交感神经系统与心理应激密切相关。星状交感神经节(Stellate ganglia,SG)发出交感神经的节后纤维进入心脏。心肌缺血损伤的伤害信息可通过背根神经节(Dorsal root ganglia,DRG)传入中枢。神经病理变化剌激时,颈部交感神经节(包括星状神经节)、背根神经节嘌呤受体P2X_3和P2X_7表达上调。噪音作为应激源可引交感神经系统兴奋,产生心理应激效应。本研究旨在观察噪声剌激对大鼠心交感功能的影响,分析星状交感神经节P2X_7受体和颈部背根神经节P2X_3受体的表达水平,以及阻断P2X_7受体和P2X_3受体对以上变化的影响,为了解星状交感神经节P2X_7和背根神经节P2X_3受体在心理应激机制中的作用提供实验依据。方法:将25只雄性SD大鼠随机分为5组,每组5只:对照组、音乐组、噪音组、噪音+P2X_7拮抗剂(Brilliant blue G,BBG)组、噪音+P2X_3拮抗剂(A-317491)组,每天分别给予噪音或音乐相应的处理,连续7天,然后进行下述检测分析:(1)使用无创血压计测量各组大鼠的血压、心率及心率变异性,观察音乐刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X_7受体拮抗和噪音刺激加P2X_3受体拮抗对大鼠心交感功能的影响;(2)测定并比较各组大鼠的心电图特点(ST段),观察音乐刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X_7受体拮抗和噪音刺激加P2X_3受体拮抗对大鼠心肌供血的影响;(3)逆转录多聚酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)测定各组大鼠星状交感神经节P2X_7受体和背根神经节P2X_3受体的m RNA表达水平,观察音乐刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X_7受体拮抗和噪音刺激加P2X_3受体拮抗对大鼠的相关神经节嘌呤受体转录的影响;(4)蛋白印迹(Western Blot)检测各组大鼠星状交感神经节P2X_7受体和背根神经节P2X_3受体的蛋白水平,观察音乐刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X_7受体拮抗和噪音刺激加P2X_3受体拮抗对大鼠的相关神经节嘌呤受体蛋白表达的影响。结果(1)音乐组大鼠的收缩压、舒张压、心率低于对照组(p0.05),噪音组大鼠的收缩压、舒张压、心率及心率变异性高于对照组(p0.05),噪音+P2X_7拮抗剂组和噪音+P2X_3拮抗剂组大鼠的收缩压、舒张压、心率及心率变性均明显低于噪音组(p0.05-0.01);(2)噪音组大鼠心电图ST段明显压低,噪音+P2X_7拮抗剂组、噪音+P2X_3拮抗剂组大鼠心电图ST段压低现象有明显改善;(3)音乐组大鼠背根神经节P2X_3受体m RNA表达低于对照组(p0.05),而噪音组大鼠背根神经节P2X_3受体m RNA表达明显高于对照组(p0.01);噪音+A-317491组大鼠背根神经节P2X_3受体m RNA表达低于噪音组大鼠(p0.01)。(4)音乐组大鼠星状神经节P2X_7受体m RNA表达低于对照组(p0.05),噪音组大鼠星状神经节P2X_7受体m RNA表达高于对照组(p0.05),噪音+BBG组大鼠星状神经节P2X_7受体m RNA表达低于噪音组(p0.05)。(5)音乐组大鼠的背根神经节P2X_3受体蛋白表达低于对照组(p0.05),噪音组大鼠背根神经节P2X_3受体蛋白表达高于对照组(p0.05),噪音+A-317491组大鼠背根神经节P2X_3受体蛋白表达低于噪音组(p0.01)。(6)音乐组大鼠星状神经节P2X_7受体蛋白表达低于对照组(p0.05),噪音组大鼠星状神经节P2X_7受体蛋白表达高于对照组(p0.05),噪音+BBG组大鼠星状神经节P2X_7受体蛋白表达低于噪音组(p0.05)。结论:噪音刺激后大鼠血压升高、心率加快,心率变异性增大,心电图出现异常变化,背根神经节P2X_3受体m RNA、蛋白表达升高,星状神经节P2X_7受体m RNA、蛋白表达升高;而通过P2X_7受体、P2X_3受体拮抗剂干预能抑制背根神经节P2X_3受体和星状神经节P2X_7受体的m RNA和蛋白表达,降低大鼠的血压、心率和心率变异性异常变化,改善心电图ST段。因此,抑制大鼠背根神经节P2X_3受体或星状神经节P2X_7受体表达能有效抑制噪音刺激引发的大鼠交感神经兴奋。
【关键词】:噪音模型 星状神经节 背根神经节 P2X_3受体 P2X_7受体 BBG A-317491
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R33
【目录】:
- 摘要3-5
- ABSTRACT5-10
- 中英文缩略词表10-11
- 第1章 引言11-13
- 第2章 材料与方法13-23
- 2.1 材料13-17
- 2.1.1 动物13
- 2.1.2 主要试剂13-14
- 2.1.3 主要仪器14-15
- 2.1.4 溶液配制15-17
- 2.2 方法17-23
- 2.2.1 实验动物的分组17
- 2.2.2 大鼠噪音模型的建立17-18
- 2.2.3 大鼠血压、心率、心电图、心率变异性的测定18
- 2.2.4 神经节P2X受体m RNA的RT-PCR检测18-20
- 2.2.5 神经节P2X受体蛋白的蛋白印迹分析20-22
- 2.2.6 统计方法22-23
- 第3章 结果23-31
- 3.1 噪音对大鼠血压、心率及心电图的影响23-26
- 3.1.1 噪音对大鼠血压的影响23-24
- 3.1.2 噪音及P2X受体阻断对大鼠心率的影响24
- 3.1.3 噪音及P2X受体阻断对大鼠心电图的影响24-26
- 3.2 噪音对神经节P2X受体m RNA表达的影响26-29
- 3.2.1 噪音对背根神经节P2X_3 m RNA表达的影响26-28
- 3.2.2 噪音对星状神经节P2X_7 m RNA表达的影响28-29
- 3.3 噪音对神经节P2X受体蛋白表达的影响29-31
- 3.3.1 噪音对背根神经节P2X_3蛋白表达的影响29-30
- 3.3.2 噪音对星状神经节中P2X_7蛋白表达的影响30-31
- 第4章 讨论31-34
- 第5章 结论34-35
- 致谢35-36
- 参考文献36-40
- 攻读学位期间的研究成果40-42
- 综述42-51
- 参考文献48-51
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本文编号:335218
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