Pax2通过Runx2促进小鼠间充质干细胞的增殖及成骨向分化

发布时间：2021-08-21 14:56

　　目的:探讨配对盒基因2（paired box 2,Pax2）对小鼠胚胎间充质干细胞增殖及成骨向分化能力的影响。方法:本实验采用小鼠胚胎间充质干细胞系C3H/10T1/2及原代培养的小鼠骨皮质来源间充质干细胞（mouse compact bone-derived mouse MSCs,mMSCs）,对细胞行体外成骨诱导后,采用蛋白质印迹法（Western Blotting,WB）及细胞免疫荧光检测Pax2在成骨诱导过程中的原始表达,免疫组化检测C57BL/6小鼠胚胎期17.5天（E17.5）及出生后21天（P21）胫骨切片Pax2的表达。重组慢病毒转染C3H/10T1/2及mMSCs敲低Pax2,CCK-8法、流式细胞术检测Pax2对细胞增殖、周期及凋亡的影响;实时定量PCR、WB检测成骨相关基因表达;碱性磷酸酶（ALP）及茜素红（ARS）染色检测矿化影响。生物信息学（Genomatix数据库）预测Pax2在Runx2启动子区域的结合位点,荧光素酶报告基因检测Runx2的转录活性。WB及细胞免疫荧光进一步检测MAPK信号通路相关基因（ERK,JNK,p38）磷酸化表达水平。利用BALB/... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：122 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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Pax2在C3H/10T1/2细胞和mMSCs成骨向分化中胞内表达逐渐增高（标尺：50μm）

Pax2在小鼠胫骨成骨细胞中的表达（标尺：50μm）

【参考文献】：
期刊论文
[1]组织工程修复区早期牙移动压力侧牙周组织的改建[J]. 李一涵,张飞飞,包世婕,魏斌,宫耀.  上海口腔医学. 2018(05)



本文编号：3355815