真核表达载体介导的ICOSIg基因在大鼠脂肪间充质干细胞中表达的实验研究

发布时间：2021-08-29 14:53

　　目的构建含可诱导共刺激分子（ICOS）融合蛋白（ICOSIg）基因的真核表达载体,探讨其能否在大鼠脂肪间充质干细胞（ADSCs）中表达。方法克隆编码大鼠ICOS的胞外片段,将其与编码人免疫球蛋白Ig G Fc段的基因融合,构建ICOSIg融合基因及其分泌型真核表达载体pc DNA3.1（+）/ICOSIg。经测序鉴定后转染ADSCs,Western blot法检测ICOSIg在ADSCs中的表达。结果经测序鉴定验证pc DNA3.1（+）/ICOSIg质粒构建成功,且能在ADSCs中成功表达。结论 ICOSIg在ADSCs中成功表达,为进一步研究免疫耐受机制提供了实验基础。 

【文章来源】：天津医药. 2020,48(08)北大核心

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

ADSCs诱导分化为成脂细胞、成骨细胞及成胰岛样细胞（×200)

pcDNA3.1（+）/ICOSIg重组质粒基因测序图

选择酶切鉴定正确的重组质粒，将其中的插入片段经测序鉴定，与GenBank上公布的目标序列完全一致，无插入、缺失和移码突变，表明质粒构建正确，见图2。2.3大鼠ADSCs的体外培养和鉴定


本文编号：3370858