基于迈克尔加成的生物硫醇比率比色荧光探针

发布时间：2021-09-22 12:44

　　小分子生物硫醇（RSH）,包括半胱氨酸（Cys）、同型半胱氨酸（Hcy）和谷胱甘肽（GSH）作为重要的细胞成分,在生理和病理过程中发挥着多种作用。文章设计合成了一种新型的比色荧光探针,N-丁基-4-（2,4-己二烯酸）酯-1,8-萘二酰亚胺（BHENA）,用于检测生物硫醇。用紫外可见分光光度法和荧光光谱法研究了探针对RSH的识别行为。结果表明,探针BHENA对RSH的响应明显强于其他不含硫醇的氨基酸和常见阴离子。特别之处在于,BHENA对RSH的响应同时表现出溶液颜色（从无色到黄色）和荧光光谱（从蓝色到黄绿色）两种特征的变化。探针BHENA与RSH的作用机制为迈克尔加成反应和分子内环化过程。 

【文章来源】：山西大学学报(自然科学版). 2020,43(02)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

探针BHENA的合成路线

良好的选择性是探针应用的前提,为了评估探针对生物硫醇的选择性,在相同的溶液体系中,我们对探针 (10 μmol/L) 和各种氨基酸和阴离子的相互作用进行了考察(图4)。Cys,GSH,Hcy(均为100 μmol/L)和其他氨基酸:L-组氨酸(His),L-谷氨酸(Glu),L-天冬酰胺(Asp),L-缬氨酸(Val),L-苯丙氨酸 (Phe),L-酪氨酸(Tyr),L-丙氨酸(Ala),L-丝氨酸(Ser),L-亮氨酸(Leu),L-精氨酸(Arg),L-脯氨酸(Pro),L-苏氨酸(Thr),L-谷氨酰胺(Glu),L-色氨酸(Trp),L-异亮氨酸(Ile),L-赖氨酸(Lys)(均为1 mmol/L)分别与探针作用80 min后检测其比率荧光强度。从图4a中可以看出,Cys存在时,BHENA的荧光比率信号(F556/F468)明显升高;与Cys相比,GSH和Hcy有一定程度的增强;其他氨基酸,在相同条件下未观察到明显的荧光变化。这一结果证明探针对RSH有一定的选择性,探针对3种RSH作用的不同,主要是由于作用时间的差异导致的,探针与Cys的作用时间比Hcy和RSH要快。进一步考察非巯基氨基酸对Cys检测的干扰情况,当1 mmol/L不含巯基的氨基酸和100 μmol/L Cys共存时,探针的比率荧光信号仍明显增强,说明探针对Cys的检测不受这些氨基酸的干扰。图3 探针(10.0 μmol/L)与RSH(1.0 mmol/L)相互作用受时间 (a)和pH (b)的影响

探针(10.0 μmol/L)与RSH(1.0 mmol/L)相互作用受时间 (a)和pH (b)的影响


本文编号：3403782