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骨髓间充质干细胞培养液对大鼠皮层神经元氧糖剥夺损伤的保护作用及机制

发布时间:2021-09-28 01:51
  目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)培养液对大鼠皮层神经元氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤后细胞存活的作用及其影响机制。方法:分别取清洁级6~8周60~80 g SD大鼠和孕16~18 d孕鼠进行BMSCs和皮层神经元培养。培养第5天的皮层神经元建立OGD损伤模型,实验随机分为4组:氧糖剥夺组(OGD组);氧糖剥夺+BMSCs培养液组(OGD+CM组),神经元OGD后培养基更换为BMSCs培养液(CM)继续培养;OGD+CM+LY294002组及OGD+LY294002组,以上2组分别加入PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002。各组培养12 h后分别通过电子显微镜和光学显微镜观察神经元形态结构。各组培养2 h后分别检测AKT、pAKT(Ser473)、激活型Casepase-3蛋白表达量,在培养48 h后检测神经元的存活率。结果:OGD培养后的神经元突起断裂、缩短、溶解,线粒体、内质网细胞器肿胀。OGD+LY294002组、OGD+CM组分别与OG... 

【文章来源】:重庆医科大学学报. 2020,45(01)北大核心CSCD

【文章页数】:5 页

【部分图文】:

骨髓间充质干细胞培养液对大鼠皮层神经元氧糖剥夺损伤的保护作用及机制


BMSCs的培养及诱导分化

表型,分子,阳性率,表面标志


第3代BMSCs高表达细胞表面分子CD29、CD90、CD106,细胞表面分子阳性率均达85%左右;基本不表达血细胞表面标志CD45,阳性率仅在2.33%(图2)。2.3 各组皮层神经元形态结构的变化

形态图,神经元,皮层,存活率


流式细胞检测结果显示,神经元OGD损伤后细胞平均存活率为(61.07±2.61)%。与OGD组比较,OGD+CM组细胞平均存活率升高,[(73.75±2.04)%]OGD+LY294002组细胞平均存活率降低[(54.59±1.58)%],差异有统计学意义(t=6.630,P=0.003;t=3.679,P=0.021);与OGD+CM组比较,OGD+CM+LY294002组细胞平均存活率降低[(50.75±1.91)%],差异有统计学意义(t=14.255,P=0.000),如图4所示。图4 各组神经元细胞平均存活率的分析


本文编号:3411015

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