小鼠抗人IgE单克隆抗体制备及鉴定

发布时间：2021-10-07 14:35

　　目的制备高特异性的小鼠抗人IgE单克隆抗体（mAb）作为候选免疫吸附剂。方法用重组人IgE重链2～4区（IgECε2-4）免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,用甲基纤维素半固体培养基法筛选杂交瘤细胞。用IgECε2-4包被酶标板,间接ELISA筛选阳性细胞株,用天然IgE、 IgG、 IgM、 IgA、 IgD包被酶标板,间接ELISA检测阳性杂交瘤细胞无血清培养上清与天然IgE的亲和性和特异性;将稳定分泌特异性抗IgE mAb的细胞株扩大培养,小鼠体内诱生腹水法制备mAb,检测腹水的效价和亲和力,利用mAb亚型鉴定试剂盒检测获得的mAb的亚型。结果经过5次细胞融合总共得到29株阳性杂交瘤细胞,有11株与天然IgE亲和性较强,有2株与其他免疫球蛋白几乎无交叉反应,分别为3E9和7B4。结论成功制备了小鼠抗人IgE mAb,该mAb具有高效价、较高亲和力和高特异性。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

ELISA检测mAb与天然IgE的亲和性

mAb与其他免疫球蛋白的结合结果表明3E9和7B4与其他免疫球蛋白反应的A值均较小(图2), 与阴性对照几乎相等。因此, 选择3E9和7B4作为候选免疫吸附剂。2.4 3E9、 7B4不与其他免疫球蛋白发生交叉反应

Western blot法检测3E9、 7B4与其他几种免疫球蛋白的交叉反应

【参考文献】：
期刊论文
[1]人IgE重链恒定区2～4区蛋白的真核表达、纯化及其相互作用分子捕获[J]. 黄慧慧,王哲彦,杨正根,李珍,王萍,董文其.  细胞与分子免疫学杂志. 2018(03)
[2]太原市0～24月龄婴幼儿过敏性疾病症状流行病学调查[J]. 穆文娟,杨建平,李彩霞.  中国药物与临床. 2017(08)
[3]过敏性疾病研究进展与展望[J]. 刘恩梅,杨锡强.  实用儿科临床杂志. 2007(21)



本文编号：3422235