人呼吸道合胞病毒F蛋白在大肠杆菌中的表达与免疫效果研究

发布时间：2021-10-15 15:54

　　人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus,hRSV）是婴幼儿和老年人发生严重呼吸道疾病的主要病因,自上世纪50年代hRSV被发现以来,科学家对hRSV疫苗进行了大量的实验探索,但至今没有上市的疫苗。本研究应用pET32a质粒在大肠杆菌BL21中表达并纯化了hRSV F蛋白（RBF）,透射电镜下RBF以三聚体的形式存在（长约20 nm的棒状结构）,与5C4抗体（识别抗原表位?）亲和常数为1.26×10^-9。混合铝佐剂肌肉注射免疫BALB/c小鼠,不同剂量（2.5μg、5μg和10μg）的RBF蛋白免疫效果无显著差异（P>0.05）,均能诱导小鼠产生高滴度的中和抗体（滴度可达2⁷）,并且可以显著降低肺脏病毒滴度,减少肺脏的病理损伤（P<0.001）。与福尔马林灭活疫苗（FI-RSV）相比,RBF诱导产生偏向Th1类的细胞和体液免疫应答。RBF在动物实验中显示出良好的保护效果,同时原核表达系统具有产量和成本上的优势,因此可以作为预防人感染hRSV的潜在候选疫苗。 

【文章来源】：病毒学报. 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
材料与方法
    1细胞、病毒和伦理
    2主要试剂
    3 RBF蛋白的表达和纯化验证
    4免疫策略
    5血清抗体与肺脏病毒测定
    6ELISPOT分析和肺脏组织苏木精和伊红（Hematoxylin and eosin,HE）染色
    7统计学分析
结果
    1 RBF蛋白纯化与构象鉴定
    2RBF诱导小鼠产生中和抗体，降低肺脏病毒滴度
    3 RBF诱导产生Th1类的免疫应答
    4 RBF蛋白减少肺脏病理损伤
讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]人呼吸道合胞病毒FHRA-HRB片段的表达纯化与鉴定[J]. 夏超,沈良华,李满妹,唐维,易善泽,牛得伟,王峰,李药兰.  暨南大学学报(自然科学与医学版). 2017(04)
[2]人呼吸道合胞病毒截短F1蛋白的原核表达及其免疫原性评价[J]. 李华,杨婷,岳磊,何晓娟,朱凡丽,谢天宏,龙润乡,杨蓉,罗芳宇,谢忠平.  中国生物制品学杂志. 2017(01)
[3]呼吸道合胞病毒F蛋白基因片段原核表达和初步应用[J]. 芦起,申昆玲,许文波,刘中华,朱贞,毛乃颖,杨锡强,余加林,王家蓉,王颖.  第四军医大学学报. 2009(21)



本文编号：3438234