斑马鱼stat1a/stat1b基因双突变对骨骼发育的影响研究

发布时间：2021-10-23 09:46

　　骨质疏松症是一种全身性代谢骨病,多见于绝经后妇女和老年男性。STAT1是细胞因子信号传导的下游通路,主要利用复杂的信号级联来发挥其生物学作用,例如促进细胞死亡,抑制细胞生长等。本研究室发现STAT1基因和骨质疏松症之间具有关联性,首次明确提出STAT1基因与人类骨质疏松密切相关。人类STAT1基因和斑马鱼stat1基因具有高度同源性,因此本文选择模式生物斑马鱼作为实验生物。本实验室已通过CRISPR/Cas9基因编辑技术分别敲除了斑马鱼的stat1a基因和stat1b基因,得到相对应的突变品系。本文运用所得到的突变品系,筛选并建立stat1a^-/-和stat1b^-/-突变模型。通过杂交手段获得斑马鱼stat1a/stat1b基因双突变模型,并开展表型观察及相关功能实验。实验发现,敲除stat1a和stat1b基因后的纯合单基因突变型幼鱼早期胚胎死亡率较高,而且其成鱼骨骼表型也有明显变化,主要变化以下颌骨长度增加、脊柱尾部弯曲和尾鳍消失为主。而stat1a/stat1b基因双突变型胚胎死亡率较野生型来说差异并不显著,其成鱼骨骼表型变化也不明显。... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

野生型与stat1bF2代突变体、stat1a17sanger测序峰图以及序列对比图

在 72h 之内，分别敲除 stat1a 基因和 stat1b 基因之后，纯合单的死亡率较野生型组明显偏高。纯合 stat1a/stat1b 双基因突变高于野生型组，但低于纯合单基因突变体组。从表中可以明育的前期：合子期（0-0.75h）、卵裂期（0.75-2.25h）和囊胚及胚胎发育的后期：咽囊期（24-48h）和孵化期（48-72h）这因突变体斑马鱼和纯合双基因突变体斑马鱼的死亡率和野生大差别。但在胚胎发育中期：原肠期（5.25-10h）和体节期（1生型斑马鱼还是纯合单/双基因突变体斑马鱼的死亡率较其他高，可见这两个时期是胚胎发育的关键时期。从图 3-3 可以得tat1a 基因或者 stat1b 基因后均会影响斑马鱼早期发育的过程，高，但将这两个基因全敲除后死亡率反而没有单基因突变体斑

硕士学位论文幼鱼 Alcian blue 软骨染色究纯合 stat1a-17 突变体斑马鱼、stat1b-S3 突变体斑马t1b 双基因突变体斑马鱼幼鱼的软骨发育，分别取其七天的幼鱼型斑马鱼幼鱼，用阿尔新蓝（Alcian blue）进行染色。

【参考文献】：
期刊论文
[1]白介素-17通过拮抗γ-干扰素的作用促进小鼠肝癌细胞的生长与增殖[J]. 李杰,闫堃,杨屹,李华,王志东,徐心.  南方医科大学学报. 2019(01)
[2]干扰素γ对星形胶质细胞中JAK-STAT细胞信号通路的激活作用[J]. 韩浩,宣丽颖,白冬松,宋葆华,宝鲁尔.  中国老年学杂志. 2018(19)
[3]干扰素γ及其受体与信号通路研究进展[J]. 冷婷婷.  甘肃科技纵横. 2015(07)
[4]骨质疏松治疗药物的研究进展[J]. 汪呈,曹宇,顾永清,张令强.  科学通报. 2014(13)
[5]骨质疏松症的流行病学趋势与防治进展[J]. 胡军,张华,牟青.  临床荟萃. 2011(08)
[6]骨质疏松症的流行病学、病因和分类[J]. 文天林,孙天胜,王玲.  人民军医. 2010(09)
[7]斑马鱼:在生命科学中畅游[J]. 孙智慧,贾顺姬,孟安明.  生命科学. 2006(05)



本文编号：3452968