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Rtn4-A/B基因敲除小鼠模型的制备

发布时间:2021-11-02 22:13
  <正>目的为深入探索Rtn4-A/B基因的生物学功能,拟制备Rtn4-A/B基因敲除小鼠。方法采用RED/ET克隆方法,使用细菌人工染色体(BAC)载体构建Rtn4-A/B基因打靶载体并使其线性化,通过电转化法将其转入129小鼠胚胎干细胞(ES细胞)。将正确同源重组的ES细胞注射入C57BL/6J小鼠囊胚腔,繁育出嵌合体小鼠后,进一步繁殖以获得杂合子小鼠。抽提小鼠尾尖组织DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型。结果基因打靶后,得到15个发生双臂正确同源重组ES细胞克隆。利用阳性ES细胞克隆进行囊胚内显微注射,得到5只嵌合率大于50%的雄鼠,最终繁育得到4只 

【文章来源】:中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编中华医学会会议论文集

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本文编号:3472468

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