人源H7N9流感病毒促进Ⅰ型干扰素产生机制的研究

发布时间：2021-11-08 14:07

　　为阐明不同来源H7N9流感病毒诱导Ⅰ型干扰素（IFN-Ⅰ）产生水平差异及其机制,本研究选取人源流感病毒A/Anhui/1/2013（AH/1）株和禽源流感病毒A/Pigeon/Shanghai/S1421/2013（PG/S1421）株作为模式病毒株,利用C57BL/6小鼠进行致病性试验。结果显示,AH/1株感染可以致小鼠发病死亡,而PG/S1421株则不会致小鼠发病。采用间接免疫荧光试验和流式细胞试验分别对两株病毒在A549细胞和小鼠腹腔巨噬细胞中的感染效率进行检测,结果显示两株病毒在两种细胞中的感染效率无显著差异。将该两株病毒分别感染小鼠腹腔巨噬细胞,在感染后不同时间点收集培养上清,并裂解细胞收取细胞总蛋白。采用ELISA方法对细胞培养上清IFN-Ⅰ含量进行测定。结果显示,感染后不同时间,AH/1株和PG/S1421株均可以诱导IFN-Ⅰ产生,但相较于PG/S1421株,AH/1株感染可以诱导细胞产生更多的IFN-Ⅰ;利用western blot对细胞总蛋白中IFN-Ⅰ产生信号通路的上游感受器分子视黄酸诱导基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）的表达水平进行检测。结果显示,在PG/S1421株感染细... 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2020,42(01)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

PG/S1421株和AH/1株对小鼠的致病性试验结果

分别通过IFA和流式细胞术检测两株流感病毒PG/S1421和AH/1对不同宿主细胞的感染效率，IFA实验结果显示两株病毒感染A549细胞和小鼠腹腔巨噬细胞的荧光数量和强度无明显差别（图2A），流式结果显示两株病毒感染两种细胞后的感染细胞数量无明显差别（p=0.5026和p=0.6379）（图2B），表明两株病毒在A549细胞和小鼠腹腔巨噬细胞中的感染效率无差别。2.3 病毒感染细胞后IFN-β表达量的检测结果

利用IFN-βELISA检测试剂盒检测两株病毒感染后小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中IFN-β的蛋白含量。结果显示，在感染后一定时间内，两株病毒均可以促进细胞中IFN-β表达，并且IFN的表达量随时间的延长而增加（图3），但是相较于PG/S1421,AH/1株能够诱导产生更多的IFN-β，结合2.2中结果，两株H7N9病毒对宿主细胞的感染效率不存在显著差异，表明IFN含量差异不是由于感染效率不同引起的。2.4 病毒感染细胞后胞内RIG-I表达量的检测结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]A型流感病毒逃避免疫应答的策略[J]. 赵朴,郑玉姝,乔传玲,贾贝贝,刘兴友.  生物化学与生物物理进展. 2008(10)



本文编号：3483850