PD-L1疫苗中引入不同免疫原性氨基酸对T细胞亚群分化的影响

发布时间：2021-11-13 19:42

　　为了比较内源性的3-硝基酪氨酸与非天然的4-硝基苯丙氨酸在PD-L1疫苗中的引入对T细胞亚群分化的影响,利用遗传密码扩充技术,将这两种免疫原性氨基酸分别引入到PD-L1疫苗的相同位点,获得具有3-硝基酪氨酸以及4-硝基苯丙氨酸的两种PD-L1突变体。用这两种突变体免疫小鼠,分析对小鼠脾脏T细胞亚群分化的影响。流式细胞术检测结果显示,4-硝基苯丙氨酸在PD-L1疫苗中的引入可促进Th1细胞的极化,同时降低Treg细胞的比例,3-硝基酪氨酸的引入对Th1细胞的极化无影响,同时能显著提高Treg和Th17细胞的比例。二者在PD-L1疫苗中的引入均能促进脾脏CD8⁺T细胞的应答,其中含有4-硝基苯丙氨酸的PD-L1突变体应答效果更强。实验结果表明,与内源性的3-硝基酪氨酸在PD-L1疫苗中的引入相比,非天然的4-硝基苯丙氨酸更适合用于肿瘤疫苗的设计。 

【文章来源】：中国药科大学学报. 2020,51(03)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 试剂
    1.2 仪器
    1.3 动物
    1.4 菌种和质粒
2 方法
    2.1 WT PD-L1疫苗分子的表达
    2.2 3-硝基酪氨酸和4-硝基苯丙氨酸取代的PD-L1表达菌株的构建
    2.3 3-硝基酪氨酸和4-硝基苯丙氨酸取代的PD-L1蛋白的表达与纯化
    2.4 动物分组及免疫方案
    2.5 流式细胞术测定各组对T细胞亚群分化的影响
    2.6 统计学分析
3 结果
    3.1 3NO2Tyr11PD-L1和4NO2Phe11PD-L1菌株的构建
    3.2 WT PD-L1、3NO2Tyr11PD-L1和4NO2Phe11PD-L1蛋白的表达
    3.3 WT PD-L1、3NO2Tyr11PD-L1、4NO2Phe11PD-L1蛋白的纯化及Western blot鉴定
    3.4 4NO2Phe11PD-L1和3NO2Tyr11PD-L1免疫对小鼠脾脏内Th1、Th2细胞亚群的影响
    3.5 4NO2Phe11PD-L1和3NO2Tyr11PD-L1免疫小鼠对脾脏内Treg细胞比例的影响
    3.6 4NO2Phe11PD-L1以及3NO2Tyr11PD-L1免疫小鼠后脾脏内Th17细胞比例
    3.7 4NO2Phe11PD-L1和3NO2Tyr11PD-L1免疫小鼠对脾脏内CD8+T细胞的影响
4 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]含对硝基苯丙氨酸HER2疫苗的免疫原性研究[J]. 何羽,田浤,戴鑫,姚文兵,高向东.  中国药科大学学报. 2018(03)



本文编号：3493601