病理组织PAS染色影响因素分析

发布时间：2021-11-15 06:34

　　目的分析病理组织过碘酸雪夫氏（periodic acid Schiff, PAS）染色的影响因素,以期提高其染色效果。方法选取已知含有PAS阳性物质的胃粘膜组织,分别制作成蜡块,通过对比试验,比较高碘酸水溶液不同染色时长、雪夫氏（Schiff）试剂不同配制方法、Schiff试剂不同保存时间对PAS染色质量的影响。结果胃粘膜组织在使用高碘酸水溶液染色11～15min优于其他时长,Schiff试剂热配法优于冷配法,试剂保存2个月内的染色效果优于试剂保存大于2个月者。结论胃粘膜组织使用高碘酸水溶液染色11～15min、热配法配制的Schiff试剂、保存在2个月内的Schiff试剂进行染色效果最佳。 

【文章来源】：中国组织化学与细胞化学杂志. 2020,29(01)CSCD

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

高碘酸水溶液不同氧化时长染色效果比较。

雪夫氏（Schiff）试剂不同配制方法染色比较。

许多学者在PAS染色中也对高碘酸的氧化时间做了探讨。高碘酸也称过碘酸，Lyon等[4]提倡10g/L过碘酸氧化60min。祁珊珊[5]认为氧化时间应控制在10min以内，环境温度不宜超过20℃，若室温高时可缩短氧化时间。作者在实验中发现，高碘酸氧化时间不足，会影响后续Schiff试剂染色结果。高碘酸通常存贮于4℃冰箱，待染色时将其取出，需恢复至室温，氧化11～15min，能够充分氧化组织中的糖类及有关物质。环境中的温度也影响氧化效果，周围环境温度低时可适当延长氧化时间，如果周围温度高且作用时间长可出现非特异性染色，使染色结果出现假阳性。Schiff试剂的配制方法很多，其基本原理都是将碱性品红经偏重亚硫酸钠等作用，变成无色产物，即为Schiff试剂，故较为理想的Schiff试剂应为无色透明溶液。其质量主要取决于所用试剂碱性品红的质量，因此，在配制Schiff试剂时碱性品红的质量一定要纯，碱性品红有不同的厂牌和批号，纯度较高的可以少加活性炭，配制中所用的玻璃器皿要求十分干净[6]。碱性品红微溶于水，溶于乙醇和酸。碱性品红中的醛式结构是显色的关键。Schiff试剂的配制方法有热配法和冷配法。热配法采用加热煮沸的方法，可以通过加快分子之间的运动从而加速溶解和脱色；冷配法采用室温振荡、搅拌的方法，原理是增加分子之间的碰撞，促进染料的溶解与脱色。热配法促进碱性品红溶解，温度降到50℃的时候加入稀酸再搅拌，使其溶解的更为彻底，且能让反应更为稳定，与组织中的醛基结合更好。冷配法因为没有加热，碱性品红溶解不充分，影响了染色效果，缩短了试剂有效期。


本文编号：3496233