PI3Kγ对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用研究
发布时间：2021-11-21 08:47
目的:探究PI3Kγ在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法:构建C57BL/6J小鼠肝脏缺血再灌注模型和RAW264.7小鼠巨噬细胞缺氧复氧模型,给予IPI549（PI3Kγ特异性抑制剂）干预,Western blot检测组织和原代细胞p110γ（PI3Kγ）蛋白水平,以ALT、HE染色、TUNEL评价肝脏损伤水平,qRT-PCR检测RAW264.7细胞缺氧复氧过程TNF-α和p110γ的mRNA水平,Western blot检测细胞TNF-α、JNK、p-JNK蛋白表达情况,ELISA检测细胞上清TNF-α水平。结果:和原代肝细胞相比,枯否细胞显著高表达p110γ（PI3Kγ）蛋白。与sham组比较,IR组肝组织中p110γ的蛋白水平降低;而使用IPI549（PI3Kγ特异性抑制剂）干预小鼠,可加重小鼠肝脏缺血再灌注后肝组织损伤和肝脏组织细胞凋亡,利用GdCl3封闭枯否细胞,IPI549加重的肝组织损伤和细胞凋亡得到缓解。在体外实验中,RAW264.7细胞经缺氧复氧处理后,细胞中p110γ的mRNA表达水平下降,IPI549干预使细胞缺氧复氧处理后,TNF-α的...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肝脏IR模型的构建及p110γ蛋白表达情况
重庆医科大学硕士研究生学位论文部点片状坏死灶和门管区炎性细胞浸润，肝血窦充血肿胀，部分肝细胞、排列紊乱；IPI549 + IR 组与 IR 组相比肝组织损伤更为严重，出现片状大量炎症细胞浸润，肝血窦结构界线不清，细胞广泛空泡样变，肝小叶较中央变性更重。使用 GdCl3尾静脉注射封闭 KCs 后，我们发现 GdCl3+ IR 组损伤减轻，肝细胞水肿坏死明显减少，肝小叶中央结构正常，有点；GdCl3+ IPI549 + IR 组对比 IPI594 + IR 组损伤也有了明显减轻，炎性细少，有部分肝细胞水肿、坏死，未见片状坏死灶(图 2)。
图 3 各组血清 ALT 含量（U/L）Fig.3 serum ALT level in each group（U/L）#p>0.05，**p<0.01，a:p<0.01 和 IR 组相比，b:p<0.01 和 IPI549+IR 组相比#p>0.05，**p<0.01，a:p<0.01 VS IR group，b:p<0.01 VS IPI549+IR group TUNEL 法检测小鼠肝脏组织细胞凋亡TUNEL 法检测肝组织细胞凋亡情况。TUNEL 结果显示黄棕色时为阳性高倍镜镜检可见凋亡细胞染色质聚集或碎裂。IR 组可见部分肝组织细胞凋细胞多集中在门管区附近；IPI549 + IR 组可见明显的细胞凋亡程度增高胞核固缩、碎裂；GdCl3+ IR 组较 IR 组肝细胞凋亡明显减少，细胞核染此外 GdCl3+ IPI549 + IR 组对比 IPI594 + IR 组损伤也有了明显减轻，凋量明显减少。该部分实验证明 IPI549 预处理加重了肝 IR 过程肝组织细胞这一作用同样可以被 GdCl3封闭 KCs 后所逆转（图 4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]GdCl3 abates hepatic ischemia-reperfusion injury by inhibiting apoptosis in rats[J]. Jian-Yi Li,Xi Gu,Wen-Hai Zhang,Shi Jia and Yong Zhou Department of General Surgery,Shengjing Hospital, China Medical University,Shenyang 110004,China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2009(05)
本文编号：3509174
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
肝脏IR模型的构建及p110γ蛋白表达情况
重庆医科大学硕士研究生学位论文部点片状坏死灶和门管区炎性细胞浸润，肝血窦充血肿胀，部分肝细胞、排列紊乱；IPI549 + IR 组与 IR 组相比肝组织损伤更为严重，出现片状大量炎症细胞浸润，肝血窦结构界线不清，细胞广泛空泡样变，肝小叶较中央变性更重。使用 GdCl3尾静脉注射封闭 KCs 后，我们发现 GdCl3+ IR 组损伤减轻，肝细胞水肿坏死明显减少，肝小叶中央结构正常，有点；GdCl3+ IPI549 + IR 组对比 IPI594 + IR 组损伤也有了明显减轻，炎性细少，有部分肝细胞水肿、坏死，未见片状坏死灶(图 2)。
图 3 各组血清 ALT 含量（U/L）Fig.3 serum ALT level in each group（U/L）#p>0.05，**p<0.01，a:p<0.01 和 IR 组相比，b:p<0.01 和 IPI549+IR 组相比#p>0.05，**p<0.01，a:p<0.01 VS IR group，b:p<0.01 VS IPI549+IR group TUNEL 法检测小鼠肝脏组织细胞凋亡TUNEL 法检测肝组织细胞凋亡情况。TUNEL 结果显示黄棕色时为阳性高倍镜镜检可见凋亡细胞染色质聚集或碎裂。IR 组可见部分肝组织细胞凋细胞多集中在门管区附近；IPI549 + IR 组可见明显的细胞凋亡程度增高胞核固缩、碎裂；GdCl3+ IR 组较 IR 组肝细胞凋亡明显减少，细胞核染此外 GdCl3+ IPI549 + IR 组对比 IPI594 + IR 组损伤也有了明显减轻，凋量明显减少。该部分实验证明 IPI549 预处理加重了肝 IR 过程肝组织细胞这一作用同样可以被 GdCl3封闭 KCs 后所逆转（图 4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]GdCl3 abates hepatic ischemia-reperfusion injury by inhibiting apoptosis in rats[J]. Jian-Yi Li,Xi Gu,Wen-Hai Zhang,Shi Jia and Yong Zhou Department of General Surgery,Shengjing Hospital, China Medical University,Shenyang 110004,China. Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2009(05)
本文编号：3509174
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