肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1引起Th17免疫应答机制初步研究

发布时间：2017-05-08 15:08

  本文关键词：肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1引起Th17免疫应答机制初步研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：肺炎链球菌是一种能够引起肺炎、中耳炎、脑膜炎和脓毒血症的主要病原菌之一,对儿童和老年人的危害尤为突出。接种有效的疫苗是预防肺炎链球菌感染的一种常用措施。在前期研究中,我们获得了一株2型肺炎链球菌减毒株SPY1。实验研究发现将其作为活菌疫苗免疫小鼠后,能有效保护小鼠抵抗肺炎链球菌感染,进一步的机制研究发现这种免疫保护作用与Th17型免疫应答有关。然而SPY1引起Th17应答的具体机制并不清楚。抗原提呈细胞,如树突状细胞(DC)和巨噬细胞(MΦ)在固有免疫应答和适应性免疫应答中都发挥着极为重要的作用。在本研究中,我们成功培养了小鼠骨髓来源的巨噬细胞和树突状细胞,将SPY1分别与巨噬细胞和树突状细胞作用后,观察其对这些抗原提呈细胞免疫应答的作用及应答的潜在机制。结果显示：SPY1与巨噬细胞作用后,能够引起巨噬细胞产生强烈的免疫应答,分泌大量TNF-α、IL-6和IL-12等细胞因子。由于TLR2和TLR4在肺炎链球菌引起的免疫应答中起重要作用,我们进一步利用相应缺陷鼠研究了TLR2和TLR4在SPYl引起的巨噬细胞免疫应答中的作用,结果提示SPY1引起的巨噬细胞应答并不依赖于TLR2和TLR4。 SPY1能够激活巨噬细胞内MAPK PI3K和NF-KB信号通路,经相应抑制剂处理后,SPY1引起的巨噬细胞应答显著减弱,表明SPY1可通过MAPK. PI3K和NF-κB信号通路引起巨噬细胞免疫应答。与树突状细胞作用后,我们发现SPY1能够有效激活DC,促使其高表达TNF-α,IL-6、IL-23和IL-12等细胞因子以及协同刺激分子CD40、 CD86和MHCⅡ,并且能够活化MAPK和NF-κB信号通路。与野生菌株D39相比,SPY1激活DC成熟活化的能力显著强于D39。进一步将SPY1活化的DC与小鼠同源异体的CD4T细胞共培养,我们发现SPY1活化的DC能够有效促进Th1和Th17细胞分化。为进一步明确DC的作用,我们将SPY1处理后的DC过继转移给小鼠后,发现这种接受了SPY1活化的DC免疫后的小鼠脾细胞同样能够产生显著的Th1和Th17免疫应答,而D39活化的DC产生的Th1和Th17免疫应答十分微弱。总之,本研究我们发现肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1能够有效激活巨噬细胞和树突状细胞,产生强烈的免疫应答。SPY1引起的巨噬细胞免疫应答不依赖于TLR2和TLR4,但可通过MAPK、PI3K和NF-κB多条信号通路引起巨噬细胞免疫应答。SPY1通过MAPK和NF-κB通路使DC成熟活化,产生IL-6等细胞因子和协同刺激分子,使初始T细胞极化为Th17细胞,从而产生强烈的Th1和Th17型免疫应答。
【关键词】：肺炎链球菌 树突状细胞 巨噬细胞 疫苗 Th17细胞
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 第一部分 肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1激发小鼠巨噬细胞应答的免疫作用机制研究13-24
• 1 实验材料13-15
• 2 实验方法15-17
• 3 实验结果17-22
• 4 讨论22-24
• 第二部分 肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1通过增强树突状细胞成熟活化促进Th17免疫应答24-39
• 1 实验材料24-26
• 2 实验方法26-29
• 3 实验结果29-36
• 4 讨论36-39
• 参考文献39-44
• 全文总结44-45
• 文献综述45-57
• 参考文献51-57
• 致谢57-58
• 攻读硕士学位期间发表的论文58

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3 李s，

本文编号：351346