中性鞘磷脂酶2对缺氧预处理间充质干细胞来源的外泌体生物学特性的影响
发布时间：2021-12-17 01:44
目的探讨中性鞘磷脂酶2对缺氧预处理骨髓间充质干细胞来源的外泌体生物学特性的影响。方法分离并体外扩增6周龄C57BL/6小鼠来源的骨髓间充质干细胞,收集细胞上清,分离来自缺氧处理的外泌体（ExoH）和常氧下培养来源的外泌体（ExoN）,并鉴定其生物学特性。比较ExoH和ExoN在体内实验中对心肌细胞保护作用的差异,同时收集在缺氧预处理状态下加入中性鞘磷脂酶2抑制剂GW4869来源的外泌体（ExoH+GW）,并在体外实验中比较ExoN、ExoH和ExoH+GW对心肌细胞抗凋亡及血管新生能力的作用。结果 ExoH组小鼠心肌梗死后28 d的射血分数显著高于ExoN组（44.12%±8.12%比20.73%±7.32%,n=20,t=11.95,P<0.05）。同时发现,缺氧增加中性鞘磷脂酶2的表达,而ExoH+GW组在体外管腔形成及心肌细胞保护方面明...
【文章来源】：中国心血管杂志. 2020,25(03)
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
骨髓MSCs来源的外泌体鉴定
在小鼠心肌梗死后7、14和28 d,ExoH组小鼠心功能较ExoN组、PBS组均有明显改善,其中28 d时ExoH组小鼠射血分数显著高于ExoN组(44.12%±8.12%比20.73±7.32%,n=20,t=11.95,P<0.05,图2A),并且28 d组织学分析表明ExoH能显著减少心肌梗死后瘢痕面积(各组梗死面积百分比:PBS组55.42%±4.32%,ExoN组44.62%±4.21%,ExoH组34.15%±5.32%,n=8,P<0.05,图2B)。2.3 缺氧增加nSMase2的表达可能是由缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)调控的
与常氧下比较,缺氧预处理后,MSCs中的nSMase2的表达明显升高,nSMase2蛋白水平升高约1.5倍,而mRNA水平升高约5.4倍,n=10,P<0.05(图3A)。我们已知Hif-1α可在缺氧状态下被激活并参与重要调控。为进一步研究nSMase2与Hif-1α的关系,我们采用DMOG,一种HIF-1α羟化酶抑制剂,避免Hif-1α在常氧下分解。研究发现,加入DMOG后的MSCs中nSMase2和HIF-1α表达一致性增加,nSMase2和HIF-1α分别升高2.1倍和2.5倍,n=8,P<0.05(图3B),因此考虑nSMase2可能是由HIF-1α调控的。2.4 nSMase2抑制剂GW4869削弱ExoH的促血管新生能力
本文编号：3539183
【文章来源】：中国心血管杂志. 2020,25(03)
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
骨髓MSCs来源的外泌体鉴定
在小鼠心肌梗死后7、14和28 d,ExoH组小鼠心功能较ExoN组、PBS组均有明显改善,其中28 d时ExoH组小鼠射血分数显著高于ExoN组(44.12%±8.12%比20.73±7.32%,n=20,t=11.95,P<0.05,图2A),并且28 d组织学分析表明ExoH能显著减少心肌梗死后瘢痕面积(各组梗死面积百分比:PBS组55.42%±4.32%,ExoN组44.62%±4.21%,ExoH组34.15%±5.32%,n=8,P<0.05,图2B)。2.3 缺氧增加nSMase2的表达可能是由缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)调控的
与常氧下比较,缺氧预处理后,MSCs中的nSMase2的表达明显升高,nSMase2蛋白水平升高约1.5倍,而mRNA水平升高约5.4倍,n=10,P<0.05(图3A)。我们已知Hif-1α可在缺氧状态下被激活并参与重要调控。为进一步研究nSMase2与Hif-1α的关系,我们采用DMOG,一种HIF-1α羟化酶抑制剂,避免Hif-1α在常氧下分解。研究发现,加入DMOG后的MSCs中nSMase2和HIF-1α表达一致性增加,nSMase2和HIF-1α分别升高2.1倍和2.5倍,n=8,P<0.05(图3B),因此考虑nSMase2可能是由HIF-1α调控的。2.4 nSMase2抑制剂GW4869削弱ExoH的促血管新生能力
本文编号：3539183
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