肠道病毒71拮抗天然抗病毒因子A3G机制研究

发布时间：2021-12-25 09:37

　　肠道病毒属于小核糖核酸病毒科,是单股正链RNA病毒,能够引起包括呼吸系统疾病、心肌炎、中枢神经系统疾病以及手足口病在内的很多人类疾病,对世界公共卫生安全造成了很大威胁,EV71、CA6和EVD68都是肠道病毒中致病性很强的病原体。A3G是APOBEC家族的成员,具有胞嘧啶脱氨酶的活性以及RNA结合活性,对于Vif缺陷的HIV-1具有强烈的抗病毒作用。同时,A3G也能够限制其他逆转录病毒以及DNA病毒的复制,具有广谱的抗病毒作用。在我们最新的研究中也发现,A3G对于EV71这种小核糖核酸病毒同样具有抑制作用。病毒在不断地复制繁衍中也进化出了很多拮抗宿主免疫系统的能力,例如HIV-1 Vif通过蛋白酶体途径降解A3G等。在之前的研究中,我们发现了EV71感染的细胞中A3G蛋白水平的下调,这可能是EV71拮抗A3G限制作用导致的,因此我们探究了其中的机制。我们发现,EV71 2C蛋白能够以自噬依赖的方式诱导A3G的降解。首先我们考察了包括2A、2B、2C和3C等在内的EV71非结构蛋白是否诱导A3G降解,发现只有2C具有这一功能。在加入了溶酶体抑制剂Baf A1之后,与对照组相比A3G的蛋白...

【文章来源】： 吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

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中文摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 肠道病毒
        1.1.1 肠道病毒概述
        1.1.2 肠道病毒与细胞自噬
    1.2 肠道病毒A71型
    1.3 肠道病毒D68 型与柯萨奇病毒A6型
    1.4 APOBEC3G蛋白
        1.4.1 APOBEC家族
        1.4.2 APOBEC3G抗病毒功能
    1.5 创新点
第2章 材料与方法
    2.1 仪器、材料与试剂
        2.1.1 主要实验仪器
        2.1.2 主要试剂与材料
        2.1.3 质粒、细胞系与病毒毒株
        2.1.4 引物合成与质粒测序
    2.2 实验方法
        2.2.1 突变质粒的构建
        2.2.2 细胞复苏、细胞传代与转染
        2.2.3 Western blot实验
        2.2.4 免疫共沉淀实验
        2.2.5 免疫荧光共定位实验
        2.2.6 病毒扩增、病毒滴度测定与病毒的超速离心
        2.2.7 荧光素酶报告系统实验
        2.2.8 RT-qPCR
        2.2.9 shPCBP1-RD细胞系的构建
第3章 结果与讨论
    3.1 EV712C降低A3G的表达
    3.2 EV712C诱导A3G降解与自噬-溶酶体途径有关
    3.3 EV712C与A3G具有直接的相互作用
    3.4 EV712C降解A3G所必需的功能区
    3.5 EV712C诱导自噬并通过自噬-溶酶体途径降解A3G
    3.6 2C蛋白自噬依赖的A3G降解功能具有普遍性
    3.7 A3G限制EVD68病毒而不是CA6病毒复制
    3.8 A3G通过抑制EVD685'UTR活性抑制病毒复制
    3.9 讨论
结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]手足口病的流行及防控策略研究进展 [J]. 覃敏兰.  职业与健康. 2018(21)



本文编号：3552221