手术后睡眠剥夺对大鼠学习记忆能力影响的机制研究

发布时间：2022-01-05 03:05

　　目的:采用改良水平台法构建成年大鼠脾切除术术后睡眠剥夺模型,探索麻醉、手术、睡眠剥夺对大鼠学习记忆能力的影响,以及IL-6和Tau-ser396在睡眠剥夺前后的表达差异。方法:80只健康成年SD大鼠（200-200g,6-7W）在施加干预前进行Y-迷宫行为学测试,将学会的大鼠用随机数字法分成空白组（C组,n=10）、麻醉组（A组,n=10）、手术组（S组,n=10）、睡眠剥夺组（SD组,n=10）、麻醉+睡眠剥夺组（ASD,n=10）,手术+睡眠剥夺组（SSD,n=10）,随后继续测试3天后给予对应处置,次日采用改良多平台法行睡眠剥夺,在术后的第3、5、7天继续进行Y-迷宫测试,对比各组大鼠学力习记忆能力改变。WB检测各组IL-6、Tau-ser 396蛋白的相对表达水平,免疫荧光双染确定IL-6和Tau-ser396的位置关系。结果:在施加干预前,各组Y-迷宫测试结果无统计学差异,在术后第3、7天,各组犯错次数明显高于空白组（P均<0.05）,复合睡眠剥夺组的大鼠犯错次数明显低于单独的手术/麻醉组（P均<0.05）。Western blot结果显示,A组、S组、SD组、A... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实验流程图

图 2 大鼠 Y-迷宫行为学测试实验结果图 A 代表大鼠在施加干预前后行为学测试结果，其中 B1 表示术前第 1 天，B2 表示术前第 2 天B3 表示术前第 3 天，A3 表示术后第 3 天，A5 表示术后第 5 天，A7 表示术后第 7 天，采用 two-wANOVA 方法分析，* 表示与空白组对比，P＜0.05，# 与麻醉组对比，P＜0.05，&表示与手组对比，P＜0.05。图 B 表示各组犯错次数在时间上的变化，数据为各组均数。3.2 Western Blot 结果与空白组对比，其余各组 IL-6、Tau-ser396 相对表达量明显升高，其差异具有统计学意义（P＜0.05）。手术组 IL-6 蛋白相对表达量明显高于麻醉组、睡眠剥夺组（P＜0.01），麻醉组 IL-6 蛋白相对表达量明显睡眠剥夺组（P＜0.001）；麻醉+睡眠剥夺组大鼠的 IL-6 蛋白相对表达量明显低于麻醉组，差异有统计学意义（P＜0.01）手术+睡眠剥夺组的 IL-6 蛋白相对表达量明显低于手术组，差异有统计学意义（＜0.01）（图 3 B）。

图 3 大鼠海马组织 Western blot 实验结果图 A 表示 6 组大鼠 IL-6 和 tau-ser396 条带图；图 B 表示 6 组大鼠 IL-6 蛋白含量，图 C 表示 6组大鼠 Tau-ser396 蛋白含量，数据均以均数±标准差表示（n=3）。采用 One-wayANOVA 进行多组比较。* 表示与空白组对比，* P＜0.05，** P＜0.01，# 与麻醉组对比，# P＜0.05，## P＜0.01，### P＜0.001，& 表示与手术组对比，& P＜0.05，&& P＜0.01，&&&& P＜0.0001。3.3 免疫荧光双染结果利用免疫荧光双染技术观察各组大鼠海马组织中 IL-6 和 Tau-ser 396 的定位情况。结果显示，在手术+睡眠剥夺组的大鼠海马组织中，可以观察到 IL-6 和 Tau-ser396 共定位表达。结合 Western blot 变化趋势，提示 IL-6 可能通过某种机制参与到Tau-ser396 磷酸化过程中。


本文编号：3569600