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逆转录酶的功能性研究

发布时间:2022-01-08 09:42
  人类免疫缺陷病毒(HIV),是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒,该病毒属于逆转录病毒科,慢病毒属。同所有逆转录病毒一样含有两条基本相同的正链RNA作为基因组。逆转录病毒基因组的复制,是在逆转录酶(RT)的作用下,以病毒RNA基因组为模板,经过两次精确的链转移步骤(与模板分离/再结合),逆转录成两端分别带有相同LTR的双链前病毒DNA基因组而完成。迄今为止,研究者对病毒逆转录过程中链转移的研究一般使用三个系统:第一个系统应用两个携带不同RNA基因组病毒的单轮感染系统。在该系统中进行逆转录反应时,逆转录酶可以在同一模板不同位点或不同模板之间发生链转移作用。然而,只有发生在同一方向的链转移才可能产生可以整合到宿主细胞基因组中的双链前病毒DNA。这样的链转移现象很容易通过前病毒DNA测序方法被检测到。但如果逆转录过程异常终止,或发生方向相反的异常链转移就可能产生两端缺失LTR的DNA产物,不能完成前病毒DNA的整合步骤,故而这样的逆转录产物无法被检测到。第二个系统使用一对供体RNA和受体RNA,利用标记性逆转录引物起始逆转录反应,当c DNA沿“供体RNA”逆转录至模板的5’端时,通过5’端所含... 

【文章来源】:吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:132 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

逆转录酶的功能性研究


逆转录过程中的链转移模型

链转移,机制,片段,逆转录酶


3 图 1.3 切入 机制引发链转移Chen, Robert, et al. The Journal of Biological Chemistry, 2003)合成 cDNA 片段时(带箭头黑色实线),逆转录酶的 RNase),暴露出正在合成的 cDNA 片段,使供者模板(灰色实线)

位点,受者,同源区,同源序列


4 图 1.4 切入位点的确定(Vandana PB, Min S, et al. Virus Research, 2008)色)和受者模板(红色)重合的区域为同源序列区。不板的 同源区序列完全同源。因此,这些核酸链可竞争


本文编号:3576330

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