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小鼠B细胞亚群及其组织分布的流式细胞检测方法的优化

发布时间:2022-01-14 04:18
  目的优化B细胞亚群及其组织分布的流式细胞分析的荧光染色方案,以用于免疫调控药物的活性评价。方法取小鼠外周血、腹膜腔细胞、脾细胞、淋巴结细胞和骨髓细胞,分别通过3种荧光抗体染色方案对各种细胞进行染色:①抗B220,CD5和CD11b的荧光抗体及7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色;②抗B220,CD43,CD93,CD23和IgM的荧光抗体及7-AAD染色;③抗B220,CD27和CD138的荧光抗体及7-AAD染色。然后利用流式细胞术分析B细胞亚群,通过优化的表面标志物组合确定各种B细胞亚群,再统计各种B细胞亚群在多种组织中的分布。结果第①种染色方案可区分B1a,B1b和B2细胞;第②种染色方案可区分原始B细胞、不成熟和成熟B细胞;第③种染色方案可区分记忆性B细胞和浆细胞。外周血中主要包含成熟B细胞和一种特殊的不成熟B细胞;腹膜腔中主要包含B1a细胞和成熟B细胞;脾中主要包含成熟B细胞、边缘区B细胞及T1和T2期不成熟B细胞;淋巴结中主要包含成熟B细胞;骨髓中包含各种发育阶段B细胞,主要包含前B细胞(pre-B细胞)和T1期不成熟B细胞。记忆性B细胞和浆细胞在各种组织中都只占B细胞的较... 

【文章来源】:中国药理学与毒理学杂志. 2020,34(04)北大核心

【文章页数】:9 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 动物、试剂和仪器
    1.2 细胞样本制备
    1.3 荧光抗体孵育
    1.4 流式细胞分析
    1.5 统计学分析
2 结果
    2.1 外周血中B细胞及其亚群的比例
    2.2 腹膜腔中B细胞及其亚群的比例
    2.3 脾中B细胞及其亚群的比例
    2.4 淋巴结中B细胞及其亚群的比例
    2.5 骨髓中B细胞及其亚群的比例
3 讨论



本文编号:3587793

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