滋养层细胞来源的微颗粒介导免疫避孕机制在小鼠模型中的研究

发布时间：2022-01-14 21:00

　　【目的】微颗粒（MPs）是大小为100nm-1000nm的细胞外囊泡,是细胞在激活或者凋亡时通过细胞膜结构改变释放的。微颗粒可以携带亲代细胞的免疫抗原进行细胞间交流,认为滋养层细胞来源微颗粒（Tr-MPs）在妊娠的建立和维持中发挥重要作用,但是作用机理不明。本研究,在体外制备Tr-MPs,通过动物模型,研究Tr-MPs是如何促进树突状细胞（DCs）成熟,如何诱导母体T细胞激活,是否对胎盘滋养层细胞产生免疫攻击,从而提前终止妊娠。本文通过对Tr-MPs介导的免疫避孕机制的研究,试图探讨着床与妊娠维持平衡的关键,及寻找潜在的新型免疫疫苗。【方法】1、建立动物模型研究Tr-MPs作为避孕疫苗的安全性,有效性及可逆性:研究Tr-MPs的安全性及对小鼠肝肾功能的影响;研究Tr-MPs作为避孕疫苗的有效性及可逆性;2、研究Tr-MPs与DCs的相互作用:流式细胞仪和双光子共聚焦显微镜检测DCs摄取Tr-MPs的效率;体外和体内实验研究Tr-MP对DCs表型的影响;3、研究Tr-MPs对T细胞的活化:体外和体内实验研究Tr-MPs对小鼠T细胞的激活;研究Tr-MPs是否诱导小鼠T细胞分化。【结果】1... 

【文章来源】： 赖少阳 华中科技大学

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

滋养层细胞释放微颗粒的情况

21. 小鼠疫苗接种时间轴。第 1 组为 Tr-MPs 处理组，第 2 组为 PBS 对照组，一，第 7 天后开始合笼，连续交配 3 天，休息 4 天，周期性进行交配。C.方法同 天小鼠体重变化。●为 PBS 对照组，□为 Tr-MPs 处理组。D. 方法同 A，疫苗接血 ALT、AST、Cr 变化。□为 PBS 对照组，■为 Tr-MPs 处理组。E. 方法同 A小鼠生育情况。●为 PBS 对照组，□为 Tr-MPs 处理组。F. 方法同 B，疫苗接种 。●为 PBS 对照组，□为 Tr-MPs 处理组。

A.Tr-MPs 与 im BMDCs 共孵育后表面标志的变化。红颜色表示对照组的 BMDC表示同型（Isotype）对照组，蓝颜色表示 Tr-MPs 刺激的 BMDCs。B. 流式分析共DCs 的 CCR7、CD80、CD86、MHCⅡ的阳性率。□为未添加 Tr-MPs 刺激 BMDC为 Tr-MPs 刺激 BMDCs 处理组。C.D. Real-time PCR 检测与微颗粒共孵育后 BMDC表达。 体内研究 Tr-MPs 诱导 DCs 成熟上述体外实验已经证明 Tr-MPs 能够诱导 DCs 成熟，接下来我们将 T注射入小鼠体内，另一侧足垫注射 PBS 作为对照。48h 后取出小鼠引流结，流式检测 CD11c 阳性 DCs 细胞表面成熟标志 CD80 等的表达情况结果一致的是，Tr-MPs 处理组淋巴结 DCs 的 CD80 和 CCR7 表面标志调（图 5.A）。流式检测结果发现淋巴结内 DCs 的 IFN-γ和 IL-12 的表达图 5.B）。以上结果证明 Tr-MPs 在体内同样能够有效的诱导 DCs 的成


本文编号：3589205