日本血吸虫表皮生长因子受体基因的鉴定和功能研究（英文）

发布时间：2022-02-18 23:24

　　目的鉴定日本血吸虫表皮生长因子受体基因（SjEGFR）,并阐明其在日本血吸虫生长和生殖发育中的作用。方法通过5’-RACE和3’-RACE扩增、测序获取SjEGFR基因全长片段。采用荧光定量PCR（qPCR）技术检测该基因在日本血吸虫不同发育阶段（16、18、20、22、24、26 d）表达情况。使用整条虫体原位杂交法对感染24 d的日本血吸虫雌、雄虫SjEGFR基因转录本进行定位。通过体内持续RNA干扰（RNAi）技术特异性敲低SjEGFR基因,待虫体发育至30 d收集虫体。统计分析雌、雄虫回收数量以及虫体长度,通过明矾卡红染色观察虫体生长发育情况。结果首次鉴定了SjEGFR基因,其结构具有一个保守的酪氨酸激酶位点。整条虫体原位杂交定位显示该基因转录本在虫体各处均有表达,在雌、雄虫肠道部位呈现出明显着色的高表达。体内RNAi显示,SjEGFR基因表达被特异性敲低后,雌、雄虫生长受阻。RNAi组雌虫子宫内无虫卵,肠道内无色素沉积、卵黄腺发育迟滞、卵巢发育受阻;雄虫呈现睾丸个数减少、体积变小,出现了更多未成熟的精母细胞。结论特异性敲低SjEGFR基因表达可影响日本血吸虫生长和生殖发育,阻... 

【文章来源】：中国血吸虫病防治杂志. 2020,32(02)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
Materials and methods
    1 Ethics statement
    2 Animals and parasites
    3 Molecular cloning of the SjEGFR gene
    4 Phylogenetic analysis of the SjEGFR protein
    5 SjEGFR transcript localization by whole mount in situ hybridization(WISH)
    6 In vivo RNAi
    7 Quantitative real-time PCR(qPCR)assay
    8 Statistical analysis
Results
    1 Characterization of the SjEGFR protein
    2 SjEGFR gene expression at different ddeevveellooppmental stages and transcript localization
    3 SjEGFR regulates the growth of S.japonicum
Discussion



本文编号：3631740