S1P对缺氧/复氧诱导的共培养心肌细胞和成肌细胞损伤的影响

发布时间：2022-02-19 08:52

　　目的探讨1-磷酸神经鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate,S1P）对联合培养的大鼠骨骼肌成肌细胞及新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧所致细胞损伤的影响。方法体外分离与培养新生大鼠心肌细胞,并与大鼠骨骼肌成肌细胞共同培养,构建缺氧/复氧损伤模型,于复氧期开始给予S1P干预。利用2,4二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性,硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛（maleic dialdehyde,MDA）含量,原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡,并比较各组间差异,从而观察S1P对共同培养新生大鼠心肌细胞和大鼠骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧诱导细胞损伤的影响。结果①新生大鼠心肌细胞在培养24h后开始贴壁生长,培养6d内细胞数量未见明显变化,培养2d后倒置显微镜下见散在的具有搏动能力的心肌细胞,第3天可见散在的心肌细胞相互间连接成合胞且可见细胞搏动,4⁵d呈同一节律的搏动。②100、500、1 000nmol/L S1P均可减少共培养心肌细胞和骨骼肌成肌细胞缺氧/复氧损伤后LDH活性和MDA含量,即可减轻复氧所诱导的细胞... 

【文章来源】：华中科技大学学报(医学版). 2013,42(06)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 成肌细胞的分离与培养
        1.2.2 心肌细胞的分离与培养
        1.2.3 缺氧/复氧模型建立
        1.2.4 LDH活性及MDA含量检测
        1.2.5 原位末端标记法(TUNEL)定量检测凋亡细胞
        1.2.6 新生大鼠心肌细胞与大鼠骨骼肌成肌细胞共同培养并实施缺氧/复氧
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 大鼠骨骼肌成肌细胞免疫细胞化学鉴定
    2.2 新生大鼠心肌细胞原代培养
    2.3 缺氧导致共同培养细胞中LDH、MDA轻度增高
    2.4 复氧导致共同培养细胞中LDH、MDA进一步增高
    2.5 S1P减少共同培养细胞缺氧/复氧损伤后LDH活性和MDA含量
    2.6 S1P减少共同培养细胞缺氧/复氧损伤后的细胞凋亡
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]内质网应激介导过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡[J]. 孔曼,陈娟,周洁,朱文德,万丽敏,熊宇芳,李子希.  华中科技大学学报(医学版). 2012(03)
[2]S1P对心肌细胞的保护作用研究[J]. 袁磊,张文杰,张舵舵,赵春燕.  中国应用生理学杂志. 2011(03)



本文编号：3632600