免疫共沉淀联合质谱鉴定DAI相互作用蛋白

发布时间：2022-02-19 11:27

　　细胞可以通过胞内的DNA或RNA感受器来识别以病毒为主的微生物病原体释放在胞质中的DNA或RNA,激活下游的干扰素相关信号通路以及NF-KB信号通路,从而促进干扰素及其它炎症因子的产生。经由免疫反应,病毒复制与扩散得到了有效阻滞。在一些情况下,也会施行激发细胞死亡的策略来匹敌入侵的病原体。DAI（ZBP1）是胞内DNA感受器之一,是一种可被干扰素诱导的蛋白。比来的工作表明,DAI也可以辨识某些病原体的RNA。在甲型流感病毒感染的情况下,DAI可以识别该病毒的RNA,并通过RIP3（RIPK3）介导细胞凋亡或坏死。而在不依赖RIP3的情况下,结合了病毒RNA的DAI也可以介导细胞凋亡的发生。然而,其详细的分子机制还没有明晰。为了阐明这一生物学过程的分子机制,我们通过免疫共沉淀联合质谱及生物信息学分析,在不表达RIP3的HEK293T细胞中鉴定出了一种全新的DAI结合蛋白,PKR（eif2ak2）。并且我们利用CO-IP证明了二者的结合。同时,我们的研究结果表明,在HEK293T细胞中过表达全长的DAI及其片段1-194和195-429均能引起细胞凋亡。过表达PKR会增进由DAI介导的细胞... 

【文章来源】：厦门大学福建省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1. 前言
    1.1 细胞凋亡
    1.2 病原体核酸物质的识别模式
    1.3 蛋白DAI概述
    1.4 蛋白PKR概述
    1.5 研究目的与意义
2. 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验仪器
    2.3 实验方法
3. 结果与分析
    3.1 过表达DAI及其片段引发细胞凋亡
    3.2 质谱鉴定DAI相互作用蛋白
    3.3 PKR在HEK293T细胞中的表达
    3.4 HEK293T细胞中PKR对DAI表达的影响
    3.5 DAI与PKR相互结合
    3.6 HEK293T细胞中PKR促进DAI介导的细胞凋亡
    3.7 HEK293T细胞中PKR及DAI对NF-KB转录活性的调控
4. 讨论
5. 参考文献
6. 缩略词
致谢



本文编号：3632816