小鼠骨骼肌来源肌源性干细胞悬浮（共）培养增殖模式研究

发布时间：2022-02-19 12:51

　　一、研究目的1、掌握小鼠肌源性干细胞（MDSC）悬浮培养相关细胞技术,建立MDSC悬浮培养模型,为进行局部密度差异悬浮培养奠定基础。2、在悬浮培养肌源性干细胞（MDSC）的基础上初步探讨集簇与分散培养（局部密度差异）对MDSC增殖活性的影响,以筛选更利于MDSC增殖的培养方式。3、以悬浮集簇培养为基础,模拟体内MDSC自我更新与增殖环境,探索以成纤维细胞和卫星细胞作为滋养细胞对MDSC增殖的作用,初步探讨悬浮共培养对MDSC增殖的影响机制。4、在已建立的与卫星细胞直接接触悬浮共培养模式的基础上,对比单纯悬浮培养法和最常用的传统差速贴壁培养法,观察不同培养方法得到MDSC细胞量差异及对MDSC的影响,验证悬浮共培养模式的优势。二、研究方法1、实验用2周龄C57BL/6小鼠40只,通过机械分离采取四肢骨骼肌、多步酶消化法制备细胞悬液,采用悬浮培养的方式培养细胞并进行细胞计数,用流式细胞术检测细胞表面干性因子,诱导分化验证其干性。2、实验用2周龄C57BL/6小鼠20只,通过机械分离采取四肢骨骼肌、多步酶消化法制备细胞悬液进行悬浮培养获取MDSC,在培养过程中分别吹打与静置。光镜观察与细胞计... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市211工程院校985工程院校

【文章页数】：120 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分: 肌源性干细胞(MDSC)悬浮培养增殖纯化方法研究
    实验目的
    主要实验材料与仪器
    实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
第二部分:悬浮集簇培养与悬浮分散培养对MDSC增殖的影响研究
    实验目的
    主要实验材料与仪器
    实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
第三部分: 悬浮共培养对MDSC增殖的影响研究
    实验目的
    主要实验材料与仪器
    实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
第四部分: MDSC的悬浮(共)培养法与传统培养法比较研究
    实验目的
    主要实验材料与仪器
    实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
全文总结
参考文献
缩略语
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法[J]. 黄郁凯,李晓红,潘宇,林秋雄,朱杰宁,江雪燕,叶力通,余细勇.  中国病理生理杂志. 2013(01)
[2]诱导人眼轮匝肌来源肌源干细胞向许旺细胞样细胞的分化[J]. 丁维进,张文俊,孙美庆,苏志达,李翠,刘安堂,江华.  中国组织工程研究与临床康复. 2011(32)
[3]兔肌源性干细胞分离培养及诱导分化为神经细胞的研究[J]. 董月桐,冀晨阳,张金明.  中华实验外科杂志. 2008 (06)
[4]应用Percoll分离纯化组织工程用肌卫星细胞[J]. 张玉石,李汉忠,张锐强,王彭,严维刚.  中国医学科学院学报. 2006(02)



本文编号：3632931