家蝇Clip-Msp和Mdctl基因克隆表达及白假丝酵母菌刺激下Clip-Msp时空表达模式的研究

发布时间：2022-02-23 18:45

　　目的:克隆表达家蝇的Clip-丝氨酸蛋白酶基因（Clip-serine protease gene of Musca domestica,Clip-Msp）和C型凝集素基因（C-type lectin gene of Musca domestica,Mdctl）,并对Clip-Msp在白假丝酵母菌感染后的时空表达模式进行研究。方法:从课题组前期构建的微生物感染后免疫相关基因文库中筛选得到高表达基因Clip-Msp（GeneID:LOC101901626）和Mdctl（GeneID:LOC101890789）,然后依据NCBI网站上的预测序列设计引物,以家蝇三龄幼虫cDNA为模板,PCR扩增目的片段。使用生物信息学软件对它们的序列及编码蛋白作分析和预测。通过基因工程的方法,构建pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl重组质粒,随后导入到大肠杆菌BL21-DE3中诱导表达。表达产物和Ni-IDA Agarose纯化蛋白用SDS-PAGE和Western-Blot分析鉴定。以GAPDH作为内参,运用实时荧光定量PCR方法检测Clip-Msp在家蝇三龄幼虫感染白假丝酵母菌后... 

【文章来源】：贵州医科大学贵州省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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英文略缩词表
引言
第一部分 家蝇Clip-Msp和 Mdctl原核表达及生物信息学分析
    第一节 Clip-Msp基因原核表达及生物信息学分析
        材料与方法
        结果
        讨论
    第二节 Mdctl基因原核表达及生物信息学分析
        材料与方法
        结果
        讨论
第二部分 Clip-Msp在感染白假丝酵母菌后的时空表达模式研究
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
参考文献
综述
    参考文献
作者简历
致谢
学位论文数据集


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3641157