脂肪干细胞及其外泌体减轻肝细胞凋亡改善大鼠肝纤维化

发布时间：2022-02-23 03:08

　　目的探讨脂肪干细胞（ADSCs）来源的外泌体（ADSC-Exosomes）是否具有肝纤维化保护作用并进行机制探索。方法 SD大鼠原代脂肪干细胞第3～6代细胞经无外泌体培养基培养后收集上清液,经超速离心法分离外泌体并鉴定。200 g左右雄性SD大鼠50只,除空白组（10只）腹腔注射橄榄油外,其余40只均注射橄榄油+四氯化碳建立肝纤维化模型。造模第十周随机处死10只进行模型鉴定,其余30只随机分为:ADSCs组、Exosomes组和模型组（生理盐水）。治疗干预2周后检测血清谷草转氨酶AST、谷丙转氨酶ALT水平,取肝组织进行HE染色和天狼星红染色观察,免疫组织化学检测α-平滑肌肌动蛋白（α-sma）的表达,Western blot检测转化生长因子-β1（TGF-β1）和凋亡相关蛋白Bax、Bc L-2、Caspase3的表达。结果 （1） ADSCs组和Exosomes组ALT和AST水平显著低于模型组,均（P<0.05）;（2） HE染色和天狼星红染色表明模型组肝细胞呈大片死亡,结缔组织显著增生,这一情况在ADSC组和Exosomes组和Exosomes组得到明显改善;（3）α-s... 

【文章来源】：中国比较医学杂志. 2020,30(07)北大核心

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂与仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 脂肪干细胞原代培养及鉴定
        1.3.2 脂肪干细胞外泌体提取和鉴定
        1.3.3 肝纤维化模型的建立及分组
        1.3.4 病理组织切片染色
        1.3.5 肝纤维化Ishak评分
        1.3.6 血清肝功AST、ALT检测
        1.3.7 Western blot检测Bax、BcL-2、Caspase3、TGF-β1蛋白表达情况
        1.3.8 免疫组化检测α-sma的表达
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 脂肪干细胞及脂肪干细胞衍生的外泌体
    2.2 各组大鼠肝组织病理变化和肝纤维化评分
    2.3 各组大鼠血清转氨酶活性的变化
    2.4 免疫组化检测α-sma表达变化
    2.5 各组大鼠蛋白表达变化
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]氟染毒对大鼠皮肤成纤维细胞中SOST及DKK1蛋白表达的影响[J]. 刘晓利,刘芳盈,孟超,李平,张殿平,宋菁,刘克俭.  环境与职业医学. 2017(10)
[2]动物模型在间充质干细胞治疗慢性肝病临床前研究的应用[J]. 付旭锋,陈冰冰,严亚萍,王宏,王峻峰,郑冰蓉,司维.  中国实验动物学报. 2017(01)
[3]线粒体-细胞色素C途径在兔非酒精性脂肪肝肝细胞凋亡中的作用[J]. 吴方,余陈欢,张欢欢,马月,俞冰,应华忠.  中国比较医学杂志. 2016(04)
[4]四氯化碳诱导大鼠肝纤维化进展期和恢复期模型的建立[J]. 张磊,李俊,朱鹏里,黄成,吕雄文.  中国药理学通报. 2011(12)
[5]肝细胞死亡的基础与临床研究[J]. 宁琴,严伟明,王晓晶.  中华肝脏病杂志. 2008 (09)



本文编号：3640746