西格列汀联合HMS5552对2型糖尿病大鼠糖代谢的作用及机制探讨

发布时间：2022-07-07 08:14

　　目的:（1）研究西格列汀与新型葡萄糖激酶激活剂HMS5552联用对2型糖尿病SD大鼠糖代谢的作用;（2）通过药物联用探讨HMS5552的作用机制。方法:（1）100只一月龄的健康雄性SD大鼠普通饲料适应性喂养7天,随机挑取8只,作为正常对照组（normal control group,NC）,用普通饲料喂养,其余的大鼠均用高脂高糖饲料喂养,2个月后,进行一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ,40mg/kg）,诱导2型糖尿病,连续两次测定空腹血糖,浓度均≥8mmol/L确定建模成功。所有成模动物禁食12小时后,采集血液进行空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）,甘油三酯（triglyceride,TG）,总胆固醇（total cholesterol,TC）,空腹胰岛素（fasting insulin,FIns）,空腹胰高血糖素（fasting glucagon,FGC）,二肽基肽酶-Ⅳ（dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ）和胰高血糖素样多肽-1（glucagon-like polypeptide-1,GLP-1）测定;随后挑取成模动物随机分为7组... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 糖尿病概述
    1.2 糖尿病的流行特点及诊断分型
        1.2.1 糖尿病的流行特点
        1.2.2 糖尿病的诊断
        1.2.3 糖尿病的并发症
    1.3 胰腺、肝脏、小肠组织在糖尿病发病中的地位
        1.3.1 胰腺的作用
        1.3.2 肝脏的作用
        1.3.3 小肠的作用
    1.4 相关因子在糖尿病发生发展中的作用
        1.4.1 胰岛素和胰高血糖素
        1.4.2 胰腺衍生因子
        1.4.3 葡萄糖激酶
        1.4.4 肠促胰岛素
    1.5 2型糖尿病的治疗进展
        1.5.1 医学营养治疗
        1.5.2 运动治疗
        1.5.3 西医治疗
        1.5.4 中药治疗
        1.5.5 代谢手术治疗——减重手术
    1.6 国内外新靶点药物的研究进展
    1.7 展望
第2章 前言
第3章 材料与方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 主要试验仪器
        3.1.3 主要实验试剂
        3.1.4 主要试剂配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 动物模型的建立、治疗和分组方法
        3.2.2 口服糖耐量试验(OGTT)
        3.2.3 血液标本采集和血液各指标的测定
        3.2.4 组织取材
        3.2.5 葡萄糖激酶(GK)活性测定
        3.2.6 RT-PCR半定量测定大鼠肝脏组织中GKmRNA和小肠组织中GLP-1 mRNA的表达
        3.2.7 肝脏、胰腺、小肠组织的HE染色
        3.2.8 肝脏组织的油红O染色
        3.2.9 各组织因子的免疫组织化学染色
        3.2.10 蛋白印迹法(Western bloting)对不同组织中相关蛋白成分的测定
        3.2.11 各种数据的统计学分析及图片结果的处理
第4章 结果
    4.1 药物联用对大鼠糖代谢的作用
        4.1.1 建模前后实验动物形态结果比较
        4.1.2 治疗后OGTT试验结果比较
        4.1.3 治疗前后一般生化指标的结果比较
        4.1.4 治疗前后空腹血糖(FBG)、胰岛素(FIns)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的结果比较
        4.1.5 治疗前后血清DPP-Ⅳ和GLP-1 水平的结果比较
        4.1.6 治疗后各组肝匀浆GK酶活性的结果比较
        4.1.7 治疗后各组肝脏形态比较
        4.1.8 RT-PCR半定量法对治疗后各组肝脏GKmRNA和小肠GLP-1mRNA分子表达水平的比较
        4.1.9 药物治疗后肝脏、胰腺和小肠组织HE染色结果
        4.1.10 治疗后各肝脏组织油红O染色结果
        4.1.11 治疗后各组肝GK、胰腺INS和 GC及小肠GLP-1 的免疫组织化学染色结果
        4.1.12 蛋白印迹法对治疗后各组肝GK和小肠GLP-1 蛋白水平表达结果分析
    4.2 药物对大鼠糖代谢的作用机制
        4.2.1 实验选组
        4.2.2 肝脏胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和caspase-3 免疫组织化学染色的结果比较
        4.2.3 胰腺组织GLP-1和PANDER免疫组织化学染色的经过比较
        4.2.4 肝脏组织PI3K和 p-PI3K蛋白印迹结果
        4.2.5 肝脏和胰腺caspase-3和cleaved caspase-3 蛋白表达结果
        4.2.6 肝细胞和胰腺细胞胞浆、线粒体中Cyt-C的蛋白表达结果
第5章 讨论
    5.1 药物联用对糖代谢作用的讨论
        5.1.1 HMS5552 与西格列汀联用对糖耐量结果的影响
        5.1.2 HMS5552 与西格列汀联用对血液指标结果的影响
        5.1.3 两药联用对肝匀浆GK酶活性结果的影响
        5.1.4 药物联用对大鼠肝脏、胰腺和小肠组织结构的影响
        5.1.5 药物联用对大鼠肝脏GK的表达的影响
        5.1.6 药物联用对大鼠胰腺INS和 GC表达的影响
        5.1.7 药物联用对大鼠小肠组织GLP-1 表达的影响
    5.2 通过药物联用结果对HMS5552 药物作用机制的讨论
        5.2.1 分析相关因子免疫组织化学染色的结果
        5.2.2 通过WB对药物的相关作用机制中的蛋白表达水平分析讨论
    5.3 综合讨论分析和进一步需要解决的的问题
第6章 结论
参考文献
缩略语表
附录
致谢
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]胰岛素对代谢的中枢调控作用[J]. 张健维,王俊博,王梦远,刘佳瑞,刘讷鸥,郑瑞茂.  生理科学进展. 2018(06)
[2]胰岛α细胞功能及其与糖尿病发展和治疗中研究进展[J]. 王莎莎.  黑龙江医学. 2018(09)
[3]IGF-1在2型糖尿病肾病中的表达及作用[J]. 吴心语,张朝明,游小兰,张灵玲,葛一漫.  实用检验医师杂志. 2018(03)
[4]小分子葡萄糖激酶激活剂研究进展[J]. 朱林强,朱雄.  海峡药学. 2018(08)
[5]橄榄苦苷对糖尿病小鼠肝脏糖代谢的作用及机制[J]. 候丹,刘铜华.  中国实验方剂学杂志. 2018(23)
[6]糖脂毒性诱导胰岛β细胞炎症因子过表达的研究[J]. 胡朝恩,钟大鹏,艾智华.  检验医学与临床. 2018(12)
[7]胰高血糖素对不同葡萄糖培养条件下胰岛β细胞分泌胰岛素的影响及机制[J]. 丁艳洁,李思源,李军,常子涛,张震,吴媛媛.  山东医药. 2018(14)
[8]糖尿病慢性并发症的中医治疗进展[J]. 白云.  中外医学研究. 2018(08)
[9]糖尿病诊断标准再商榷[J]. 李静,张毅强,金萨茹拉,苏敬.  基层医学论坛. 2018(08)
[10]胰岛β细胞中钠通道对胰岛素分泌的作用[J]. 陈冲,魏姗姗,王松华,姚丽华.  生命科学研究. 2018(01)

博士论文
[1]胰腺、肝脏异位脂肪沉积IDEAL-IQ定量及MicroRNA-19a-3p与2型糖尿病的相关性研究[D]. 李元.重庆医科大学 2018
[2]胰岛素治疗对初诊2型糖尿病患者胰高血糖素的影响[D]. 何媛媛.安徽医科大学 2016



本文编号：3656063