胰岛素通过PI3K/Akt和MEK/ERK信号通路增强大鼠骨骼肌成肌细胞的增殖

发布时间：2022-08-09 11:43

　　本文旨在探讨胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用胰岛素作用于培养的骨骼肌成肌细胞,采用3H-TdR渗入法、BrdU检测法、MTT实验分析检测骨骼肌成肌细胞的增殖情况,用Western blot检测Akt和ERK的磷酸化水平,同时使用PI3K和MEK特异性抑制剂干预胰岛素对骨骼肌成肌细胞的增殖作用影响。结果显示,胰岛素能明显促进骨骼肌成肌细胞对3H-TdR的摄入,促进细胞的DNA合成和增殖,并且胰岛素促细胞增殖作用具有一定的量效关系,骨骼肌成肌细胞原代细胞和成肌细胞株L6、C2C12都显示该促增殖作用可被PI3K和MEK特异性抑制剂阻断,胰岛素还提高了骨骼肌成肌细胞Akt和ERK的磷酸化水平。本研究证实胰岛素可能通过PI3K/Akt和MEK/ERK信号通路促进骨骼肌成肌细胞增殖。 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 主要设备, 试剂及细胞
    1.2 方法
        1.2.1 成肌细胞的分离与培养
        1.2.2 大鼠骨骼肌成肌细胞免疫荧光细胞化学鉴定
        1.2.3 细胞分组
        1.2.4 MTT实验分析
        1.2.5 3H-TdR渗入法
        1.2.6 BrdU检测法
        1.2.7 Western blot检测Akt和ERK的磷酸化水平
        1.2.8 统计方法
2 结果
    2.1 大鼠骨骼肌成肌细胞免疫细胞化学鉴定结果
    2.2 胰岛素促进骨骼肌成肌细胞DNA合成
    2.3 胰岛素对骨骼肌成肌细胞的促增殖作用
    2.4 MEK1/2特异性活性抑制剂U0126和PI3K抑制剂wortmannin抑制胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA的合成
    2.5 胰岛素上调骨骼肌成肌细胞中Akt和ERK磷酸化水平
    2.6 Wortmannin和U0126抑制了胰岛素促进细胞株L6及C2C12的DNA合成
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]新生SD大鼠成肌细胞体外培养的实验研究[J]. 黄桂林,李龙江,温玉明,王昌美,谢文杨.  实用口腔医学杂志. 2003(01)



本文编号：3672497