Elabela促进脐带华通胶间充质干细胞向心肌样细胞分化

发布时间：2022-09-30 13:45

　　背景:Elabela是近几年发现的新型APJ内源性受体,在成人心血管系统中广泛分布,对心血管疾病也有一定的影响,但是Elabela在干细胞向心肌样细胞诱导分化过程中的作用以及分化过程中对APJ表达量的影响尚未发现相关研究。目的:探讨Elabela对脐带华通胶间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的影响。方法:复苏冻存的脐带华通胶间充质干细胞,当细胞汇合度达到80%-90%时,使用5-氮胞苷使其向心肌样细胞分化,24 h后实验组更换为含Elabela、体积分数为10%胎牛血清的低糖DMEM培养基,对照组更换为含体积分数为10%胎牛血清的低糖DMEM培养基。诱导第7,14,21,28天,观察细胞形态变化,同时收集各组细胞的总RNA和总蛋白,采用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测心肌特异性标记物Nkx2.5、c TnT、Connexin43mRNA及蛋白表达;采用实时荧光定量PCR和流式细胞技术检测诱导后的心肌样细胞中APJ的表达。结果与结论:①在诱导分化各阶段,实验组心肌特异性标记物Nkx2.5、cTnT、Connexin43 mRNA和蛋白表达量均高于对照组,APJ表达量也高... 

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文题释义：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
    1.4 实验方法
        1.4.1 脐带华通胶间充质干细胞的培养和传代
        1.4.2 脐带华通胶间充质干细胞定向心肌样细胞诱导分化
        1.4.3 Real-Time PCR检测各组细胞心肌特异性mRNA的表达
        1.4.4 Western blot检测各组细胞心肌特异性蛋白的表达
        1.4.5流式细胞术检测目的基因APJ的表达
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 脐带华通胶间充质干细胞定向心肌样细胞诱导分化
    2.2 诱导分化不同时间节点心肌特异性标志物mRNA表达
    2.3 诱导分化不同时间节点心肌特异性标志蛋白表达
    2.4 诱导分化各阶段目的基因APJ mRNA表达以及流式细胞术检测目的基因APJ表达
3 讨论Discussion


【参考文献】：
期刊论文
[1]Apelin13对人胚胎干细胞定向心肌细胞分化效率的影响[J]. 程涛,陈宇,张宁坤,高连如,王泽,张燕.  山东医药. 2017(33)
[2]Apelin-13对5-Aza诱导脐带间充质干细胞向心肌细胞分化的影响[J]. 徐小红,王力,张宁坤,郑楠,高连如,朱智明.  解放军医学杂志. 2013(10)



本文编号：3683658