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RORα在脂多糖所致小鼠巨噬细胞炎症反应中的表达变化与作用实验研究

发布时间:2022-11-06 16:11
  目的:探讨RORα在脂多糖所致小鼠巨噬细胞炎症反应过程中的表达变化与作用。方法:取小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs),加入100 ng/ml脂多糖(LPS)处理不同时间点后,利用荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测细胞中炎症因子白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),以及RORα的转录水平变化,进一步利用Western blot检测RORα蛋白水平变化;分别采用RORα激动剂SR1078和拮抗剂SR3335预处理细胞24 h后,LPS处理2 h,利用ELISA法检测细胞上清中炎症因子IL-1β,TNF-α和IL-6的含量。结果:100 ng/ml LPS在不同时间点均可显著促进BMDMs炎症因子IL-1β和TNF-α的转录水平表达(P<0.05),而在LPS处理1~12 h显著抑制了RORα的转录水平(P<0.05),同时蛋白表达水平也明显降低(P<0.05)。与LPS处理组相比,SR1078预处理,可显著抑制炎症因子的释放,而SR3335进一步激活了细胞炎症因子的释放(P<0.05)。结论:RORα对脂多糖所致小鼠巨噬细胞炎症反应具有调节作用。 

【文章页数】:4 页

【文章目录】:
材料与方法
    1 材 料
        1.1 动物:
        1.2 细胞培养与分组:
        1.3 主要试剂:
    2 实验方法
        2.1 qRT-PCR法检测细胞中蛋白转录水平:
        2.2 免疫印迹法(Western blot)检测细胞中RORα蛋白水平:
        2.3 ELISA法检测细胞培养液上清中炎症因子IL-1β,TNF-α和白介素6(Interleukin-6,IL-6)的含量:
    3 统计学方法
结 果
    1 BMDMs在LPS处理不同时间点蛋白转录水平的表达
    2 BMDMs在LPS处理不同时间点RORα蛋白水平的表达
    3 RORα对LPS所致巨噬细胞炎症因子释放的影响
讨 论


【参考文献】:
期刊论文
[1]The Roles of Orphan Nuclear Receptors in the Development and Function of the Immune System[J]. Ivan Dzhagalov.  Cellular & Molecular Immunology. 2004(06)
[2]恶性肿瘤、创伤及炎症患者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R含量的比较[J]. 张喜平,李宗芳,程琪辉,曾小澜,刘效恭.  陕西医学杂志. 2002(01)
[3]脓毒症诊断的生物学标志物[J]. 王东强,田永超,李志军.  陕西医学杂志. 2011(03)
[4]白藜芦醇对脂多糖引起小胶质细胞激活的影响[J]. 周雷鸣,张玲,房明岗,贾济.  陕西医学杂志. 2014(11)

硕士论文
[1]蛋白4.1R在LPS诱导的脓毒症中的作用及其调控机制研究[D]. 王成博.郑州大学 2018



本文编号:3703809

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