巢蛋白表达对基底前脑神经元机能的影响
发布时间:2017-05-17 00:06
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【摘要】:目的 基底前脑有一群巢蛋白免疫阳性的胆碱能神经元,但巢蛋白表达对神经元功能的影响还不清楚。本课题通过研究侧脑室秋水仙碱注射后基底前脑巢蛋白阳性和阴性胆碱能神经元变化,探讨巢蛋白表达对基底前脑神经元机能的影响及其可能机制。方法 使用成年健康雌性SD大鼠56只,随机分为7组,正常对照组和秋水仙碱注射24h、48h、3d、7d、14d和28d组,每组8只。秋水仙碱注射组大鼠按Paxinos和Watson的大鼠脑立体定位图谱,在前囟后0.8mm、左侧1.5mm和深4.65mm用微量进样器将1%秋水仙碱10ul注入大鼠左侧侧脑室,术后分别于24h,48h、3d、7d、14d和28d多聚甲醛灌注取脑。冰冻切片,行基底前脑胆碱乙酰转移酶(Ch AT)及巢蛋白(nestin)免疫组织化学染色。计数基底前脑内侧隔核(MS)、斜角带核垂直支(v DB)及水平支(h DB)的Ch AT免疫阳性(Ch AT+)神经元及nestin免疫阳性(nestin+)神经元的数目。以Ch AT+神经元数减去nestin+神经元数得到nestin阴性(nestin-)胆碱能神经元的数目,比较秋水仙碱注射后不同时间点基底前脑nestin+和nestin-胆碱能神经元的数目变化。结果 在成年大鼠基底前脑的内侧隔核、斜角带垂直支、斜角带水平支均可见nestin+神经元分布。这些nestin阳性神经元形成一个连续的细胞带,与Ch AT+神经元分布一致。大鼠侧脑室秋水仙碱注射后的24h,其基底前脑MS、v DB和h DB的nestin+和nestin-的胆碱能神经元数目都急骤下降,与正常对照组相比有显著差异(P0.01),但nestin+和nestin-神经元数目之间无显著差异(P0.05)。随着时间的推移nestin+神经元数目逐渐恢复,但nestin-胆碱能神经元数目一直维持较低水平,至术后第14d,nestin+神经元数目基本恢复至正常水平,与正常对照组比无显著差异(P0.05),但与nesin-神经元之间有显著差异(P0.01)。秋水仙碱注射后各时间点nesin-神经元与正常组对照均有显著性差异(P0.01)。结论 侧脑室秋水仙碱注射后,基底前脑nestin+和nestin-的胆碱能神经元都急骤减少,但nestin+神经元在减少后可逐渐恢复,而nestin-神经元则不能恢复。与nestin-神经元相比,nestin+神经元具有更强的神经可塑性。
【关键词】:基底前脑 巢蛋白 胆碱能神经元 秋水仙碱 免疫组织化学
【学位授予单位】:大理学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R338
【目录】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-8
- 前言8-11
- 材料与方法11-17
- 1.材料11
- 2.实验试剂11-13
- 3.实验方法13-15
- 4.脑组织nestin和ChAT免疫组化方法步骤15-16
- 5.检测组织观察指标16-17
- 6.统计学方法17
- 实验结果17-29
- 1.基底前脑nestin+神经元的分布及秋水仙碱注射后神经元数目的变化17-18
- 2.基底前脑ChAT+神经元的分布及秋水仙碱注射后神经元数目的变化18-26
- 3.秋水仙碱对基底前脑nestin+和nestin-胆碱能神经元的影响26-29
- 讨论29-34
- 结论34-35
- 参考文献35-39
- 附录39-46
- 缩略词表39-40
- 综述40-46
- 参考文献44-46
- 致谢46
【参考文献】
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本文编号:372166
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