重组人抗缪勒管激素C-末端蛋白的原核表达及纯化

发布时间：2023-01-31 03:08

　　目的原核表达重组人抗缪勒管激素（human anti-Müllerian hormone,hAMH）C-末端蛋白,并进行纯化。方法 PCR法扩增hAMH C-末端蛋白基因,插入至载体pET-28a,构建重组表达质粒pET-28a-hAMH C。重组质粒转化感受态E. coli BL21（DE3）,终浓度为1. 0 mmol/L的IPTG诱导表达h AMH C-末端蛋白。扩大培养后进行Ni亲和层析柱纯化,12%SDS-PAGE分析纯化产物。结果经菌落PCR及测序鉴定,重组质粒pET-28a-hAMH C构建正确。表达及纯化产物均可见相对分子质量约12 500的目的蛋白条带,纯度达90%以上。结论原核表达了重组hAMH C-末端蛋白,纯化后获得了较高纯度的目的蛋白。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 质粒、菌株及细胞
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 细胞培养
    1.4 目的基因的扩增
    1.5 重组质粒的构建
    1.6重组蛋白诱导表达
    1.7 扩大培养
    1.8 目的蛋白的纯化
2 结果
    2.1 目的基因PCR产物的鉴定
    2.2 重组质粒的鉴定
    2.3 重组蛋白的鉴定
    2.4 纯化产物的鉴定
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]抗缪勒管激素的临床应用[J]. 邱玲,李丹丹,程歆琦.  协和医学杂志. 2017(Z2)
[2]罗非鱼AMH基因的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 丁炜东,曹哲明,曹丽萍.  水产学报. 2010(05)

硕士论文
[1]Prdx6-11R融合蛋白的表达、纯化及功能的初步研究[D]. 韩俊岭.宁夏医科大学 2014
[2]IER5原核表达载体的构建及融合蛋白表达、纯化[D]. 梁桂芳.河北医科大学 2010



本文编号：3733670