果蝇Mre11精氨酸突变动物模型的建立及G2/M检验点检测

发布时间：2023-02-05 16:14

　　在生物体中,DNA不断受到内源和外源损伤因子的威胁。为了保护遗传信息的完整,细胞在生物进化过程中形成了一整套复杂的监控网络,用以监测基因组的完整性,称为DNA损伤应答。该网络监测DNA损伤的存在,传递损伤信号,实现多步的生物学反应,包括细胞周期阻滞、DNA损伤修复、端粒维持和细胞凋亡等。MRN复合物(酵母中MRX)由Mre11、Rad50和Nbs1(Xrs2)组成,是DNA损伤应答的一个关键组成部分,参与细胞周期检验点和损伤修复的各个方面。MRN复合物可以结合在染色体DNA上,识别双链断裂,发出损伤信号,并在DNA修复起着重要的作用。研究表明,MRN复合物突变会导致肿瘤或衰老相关疾病的发生。Mre11是MRN复合物极其重要的成员之一。到目前为止,关于Mre11的结构和功能已经进行了大量的研究。Mre11是一种高度保守的70 k Da大小的蛋白,它的N端具有Mn²⁺/Mg²⁺依赖性磷酸酯酶结构域,中部具有一个DNA结合结构域,C端含有一个甘氨酸-精氨酸富集区(Glycine and Arginine-Rich,GAR)。Mre11的主要功能包括...

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【学位级别】：硕士

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英文摘要
前言
材料与方法
    一、材料
        1. 果蝇株
        2. 果蝇饲养食材
        3. 实验试剂
        4. 缓冲液配制
        5. 实验仪器
        6. 引物
        7. 软件
    二、方法
        1. 果蝇食物的配制
        2. 果蝇胚胎的收集
        3. mre11突变果蝇的建立
        4. 单只果蝇PCR检测
        5. PCR
        6. 果蝇基因组 DNA 的提取
        7. 基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳
        8. Southern Blot检测
        9. 果蝇RNA提取
        10. 反转录法合成cDNA
        11. 果蝇存活率检测
        12. 果蝇G2/M检验点检测
结果
    1. mre11突变中间体果蝇的建立
    2. mre11突变果蝇的建立
    3. mre11突变果蝇的DNA损伤敏感性实验
    4. mre11突变果蝇的G2/M检验点检测
讨论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3735281