应用TALENs以及CRISPR/Cas9技术构建B细胞缺失免疫缺陷猪模型

发布时间：2023-03-01 17:29

　　研究背景目前应用于临床治疗的多克隆抗体主要来源于志愿者捐献,但是靠志愿者捐献来供应多克隆抗体临床使用受多方面的限制。比如,捐献者可捐献血量较少;具有交叉感染的风险;种类不全,从伦理学角度,很多病毒等致病抗原并不能用来免疫人类。因此,构建可产生人源化抗体的动物模型成为研究重点。猪在解剖结构及生理、免疫特性上与人类比较相近,且用猪作为试验动物模型存在的伦理争议较小,因此可构建人源化猪模型来大量生产人源多克隆抗体。失活猪内源性的免疫球蛋白(Ig)重链铰链区位点可造成VDJ重排障碍,进而抑制IgM蛋白的表达,影响到B细胞的正常发育及猪内源抗体的分泌。如果能在Ig重链位点失活、B细胞缺失的猪模型中,导入人源的相关基因片段,或者在B细胞发育过程中导入人源干细胞,将更有利于人源基因或细胞的互补表达,从而生成人源化嵌合体猪,在猪体内生成人源多克隆抗体。因此,要构建生成人源多克隆抗体的猪模型,首先要构建Ig重链打靶、B细胞缺陷猪。基因打靶猪模型的构建方法通常采用同源重组筛选基因打靶的体细胞,之后进行体细胞克隆的方式。由于传统的同源重组效率非常低,因此基因打靶猪模型的构建费时又费力。近几年,几种新兴的基因...

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