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CDC14B在小鼠1-细胞期受精卵各细胞周期的动态表达及其定位

发布时间:2023-03-04 19:15
  目的:检测小鼠1-细胞期受精卵各细胞周期中细胞分裂周期蛋白14B (CDC14B)的表达水平及其定位,初步阐明CDC14B对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制。方法:通过超排卵技术分别收集小鼠1-细胞期受精卵,采用RT-PCR和Western blotting法检测小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中CDC14BmRNA和蛋白表达水平;采用细胞免疫荧光法观察小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中CDC14B和β微管蛋白(β-tubulin)的共定位情况。结果:与G1期比较,小鼠S、G2和M期1-细胞期受精卵中CDC14BmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。间接免疫荧光实验,CDC14B (红色荧光)和β-tubulin(绿色荧光)在G1期和S期共定位于小鼠受精卵皮质;在G2早期,CDC14B和β-tubulin共定位于皮质和细胞质;在G2晚期,部分CDC14B入核;在M期,CDC14B和β-tubulin共定位于纺锤体。结论:CDC14B在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中动态表达,CDC14B存在核浆纺锤体转位,CDC14B的定位变化可能调控纺锤体的功能...

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 动物、主要试剂和仪器
    1.2 小鼠受精卵的采集和培养
    1.3 RT-PCR法检测1-细胞期受精卵中CDC14B mRNA表达水平
    1.4 Western blotting法检测1-细胞期受精卵中CDC14B蛋白表达水平
    1.5 细胞免疫荧光法检测CDC14B和β-tubulin在小鼠1-细胞期受精卵中各期的亚细胞共定位
    1.6 统计学分析
2 结果
    2.1 小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中CDC14BmRNA表达水平
    2.2 小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中CDC14B蛋白表达水平
    2.3 CDC14B和β-tubulin在小鼠不同细胞周期1-细胞期受精卵中的共定位
3 讨论



本文编号:3754843

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