福氏志贺菌核酸适配体的SELEX筛选及特异性研究

发布时间：2023-04-28 20:00

　　为探究核酸适配体技术在食源性致病菌检测和鉴定方面的应用,以福氏志贺菌为研究对象,采用全细胞SELEX技术筛选与其特异性结合的适配体。经多轮正筛和反筛,共克隆得到17条序列,4条高频适配体(F-1、F-3、F-9和F-16)对福氏志贺菌有较高的亲和力,其中F-1和F-9与福氏志贺菌的亲和力较高,相应的亲和常数Kd值分别为(51.3±3.25) nmol/L和(42.6±7.11) nmol/L。软件模拟F1和F9的二级结构,其最小自由能分别为-7.39 kcal/mol和-6.98 kcal/mol。本文首次筛选出对福氏志贺菌具有较高亲和特异性的适配体,为后续利用适配体进行食源性致病菌快速检测奠定了基础。

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 适配体文库的构建和引物合成
    1.3 适配体筛选过程
    1.4 适配体的测序分析及二级结构模拟
    1.5 适配体的亲和特异性考察
    1.6 适配体亲和常数考察
2 结果与分析
    2.1 SELEX筛选得到的适配子的克隆及序列分析
    2.2 适配子的亲和特异性验证
    2.3 适配子的亲和常数及其二级结构预测
3 讨论
4 结论



本文编号：3804377