尿源性干细胞在体外向尿路上皮细胞和平滑肌细胞的分化

发布时间：2023-05-14 07:14

　　背景:成体干细胞是存在于已分化组织中的多能干细胞,尿源性干细胞为新发现的成体干细胞,具有取材方便、高度增殖能力、多向分化潜能等优点,在组织工程学领域受到重视。目的:研究人尿源性干细胞体外分离获取的方法,以及体外向尿路上皮细胞和平滑肌细胞分化的可行性。方法:收集健康成人尿液标本,通过分离、培养获取尿源性干细胞;应用CCK-8实验检测细胞增殖能力,并绘制细胞生长曲线;应用流式细胞仪检测细胞表型;体外应用专用培养基诱导尿源性干细胞向尿路上皮细胞和平滑肌细胞分化;应用荧光定量PCR、免疫组织化学染色、免疫荧光细胞染色和Western blot鉴定尿源性干细胞的分化能力。结果与结论:①从健康成人尿液中成功分离提取出尿源性干细胞,细胞具有高度增殖能力,生长曲线呈现S型;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标记物,CD29表达率为98.11%,CD90表达率为95.74%;③尿源性干细胞经体外诱导分化14 d后,可以表达尿路上皮细胞特异性基因Cytokeratin 7、Cytokeratin 20、UroplakinⅢ和平滑肌细胞特异性基因α-SMA和SM22;④结果表明,尿源性干细胞经过体外诱导可...

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文题释义：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
        1.3.1 实验试剂
        1.3.2 尿源性干细胞专用培养基配制
        1.3.3 尿路上皮诱导分化专用培养基配制
        1.3.4平滑肌细胞诱导分化专用培养基配制
    1.4 实验方法
        1.4.1 尿源性干细胞体外分离实验
        1.4.2 CCK-8法检测细胞增殖情况
        1.4.3 流式细胞仪检测细胞表型
        1.4.4 尿源性干细胞向尿路上皮细胞诱导分化
        1.4.5 尿源性干细胞向平滑肌细胞诱导分化
        1.4.6 荧光定量PCR检测特异性基因表达
        1.4.7 免疫细胞化学染色检测尿路上皮细胞特异性蛋白的表达
        1.4.8 免疫细胞荧光染色检测平滑肌细胞特异性蛋白的表达
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 尿源性干细胞的生长形态
    2.2尿源性干细胞表型
    2.3尿源性干细胞的生长曲线
    2.4 尿源性干细胞向尿路上皮细胞诱导分化结果
    2.5 尿源性干细胞向平滑肌细胞诱导分化结果
3 讨论Discussion



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