重组蛋白中G418残留量超高效液相色谱-蒸发光散射检测方法的建立

发布时间：2023-05-18 22:00

　　目的建立定量检测重组蛋白中G418残留量的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)-蒸发光散射检测(evaporative light scattering detection,ELSD)法,并进行验证。方法 G418经UPLC洗脱后,通过蒸发光散射检测器检测,首先将柱洗脱液雾化形成气溶胶,然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发,余下不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中进行检测,通过标准曲线计算质控品中G418浓度。对建立的方法进行专属性、重复性、中间精密度、定量限、耐用性、线性验证。结果 G418浓度在0. 01～0. 20 mg/m L范围内,标准曲线的线性较好,R²> 0. 99,定量限为0. 01 mg/mL;质控品的加样回收率在80%～120%之间;中间精密度试验回收率的RSD为3. 44%;定量限试验回收率的RSD为5. 38%;耐用性试验回收率的RSD为4. 56%。结论 UPLC-ELSD法精密度良好,可用于重组蛋白研发及生产过程中G418残留的监测。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 样品
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 溶液制备
        1.3.1 标准溶液
    1.4 检测方法
    1.5 方法验证
        1.5.1 专属性
        1.5.2 重复性
        1.5.3 中间精密度
        1.5.4 定量限
        1.5.5 耐用性
            1.5.5. 1 柱温
            1.5.5. 2 色谱柱
        1.6线性
2 结果
    2.1 专属性
    2.2 重复性
    2.3 中间精密度
    2.4 定量限
    2.5 耐用性
        2.5.1 柱温
        2.5.2 色谱柱
    2.6 线性
3 讨论



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