雷帕霉素靶蛋白复合物1对肠道3型固有淋巴细胞功能的影响

发布时间：2023-05-18 03:39

　　目的·探究雷帕霉素靶蛋白复合物1(mechanistic target of rapamycin complex 1,mTORC1)对3型固有淋巴细胞(group 3 innate lymphoid cell,ILC3)功能的影响。方法·使用mTORC1信号通路的特异性抑制剂雷帕霉素体外刺激野生型C57BL/6小鼠肠道固有层淋巴细胞(lamina propria leukocyte,LPL),初步观察ILC3细胞数量及功能的变化;之后采用流式细胞技术分选出小鼠肠道ILC3,用白细胞介素23(interleukin 23,IL-23)刺激使其活化,再通过实时荧光定量PCR检测活化后ILC3中编码转录因子视黄酸受体相关的孤儿核受体(retinoic acid receptor related orphan receptor,RORγt)、IL-22及mTORC1关键组分Raptor(regulatory associated protein of mTOR)的基因mRNA水平;构建ILC3细胞特异性敲除Raptor的基因工程小鼠,使用苏木精-伊红染色、流式细胞技术和实时荧光定量PCR检测m...

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 主要试剂与仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 小鼠肠道固有层淋巴细胞的分离
        1.2.2流式染色
        1.2.3 实时荧光定量PCR
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 体外雷帕霉素刺激抑制ILC3分泌IL-22
    2.2 IL-23刺激后ILC3中Rptor mRNA水平表达上调
    2.3 mTORC1功能缺失不影响小鼠肠道ILC3的数量
    2.4 mTORC1功能缺失抑制ILC3分泌IL-22的能力
3 讨论



本文编号：3818597