利用荧光染料CFSE分选衰老细胞的探究

发布时间：2023-05-20 02:34

　　目的:探究利用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)进行衰老细胞分选的可行性。方法:利用CDK4/6抑制剂LY2835219诱导人口腔鳞癌细胞Cal27衰老,在LY2835219撤药后立即进行CFSE染色,避光培养,并在撤药后第0、2、4、6、8天进行衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色。通过流式细胞仪分选CFSE荧光强度高的细胞,进行SA-β-gal染色。结果:CFSE荧光标记的细胞与SA-β-gal染色阳性的细胞相一致。撤药后第4、6天利用CFSE荧光进行流式分选,CFSE-high组的细胞SA-β-gal阳性率显著高于未分选组(P<0.05)。结论:利用CFSE分选衰老细胞具有可行性,可获得活的衰老细胞。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞和主要试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞衰老诱导
        1.2.3 SA-β-gal染色
        1.2.4 CFSE荧光染色
        1.2.5 SA-β-gal与CFSE双染
        1.2.6 Western blot
        1.2.7 流式细胞分析及分选
    1.3 统计分析
2 结果
    2.1 LY2835219成功诱导Cal27细胞衰老
    2.2 CFSE荧光与SA-β-gal染色的一致性
    2.3 利用CFSE分选衰老细胞
3 讨论



本文编号：3820368