BMSCs在AMD动物模型中的应用及机制探讨
发布时间：2023-07-24 23:31
研究背景年龄相关性黄斑病变(age-related macular degeneration,AMD)是世界范围内老年人视力不可逆性下降的首位原因,因AMD致盲者约占全球盲人总数的8.7%。AMD患者年龄多在50岁以上,随着我国老龄化人口的增加,AMD患者也逐年增加。根据病理和临床表现可将AMD分为渗出型和萎缩型两种,近年来关于渗出型AMD的研究取得了一定进展,抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,anti-VEGF)的应用已被证实能够成功挽救AMD造成的视力低下,为治疗AMD提供了新的思路。但对于萎缩型AMD目前仍无有效的治疗措施,开展萎缩型AMD的防治研究是人们关注的重点之一。碘酸钠(sodium iodate,NaIO3)选择性损伤视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE),其继发引起光感受器细胞的病变特征与人萎缩型AMD相似,已成为一种经典研究模型。NaIO3模型具有发病年龄和疾病进展可人为操控、制备简单、病情稳定等优势,且某些动物的视网膜在特...
【文章页数】：110 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
中英文缩略词表
第1章 绪论
1.1 碘酸钠诱导的年龄相关性黄斑变性动物模型研究进展
1.1.1 年龄相关性黄斑变性简介
1.1.2 碘酸钠诱导的AMD模型的建立
1.1.3 NaIO3诱导的AMD模型RPE损伤的机制研究
1.1.4 NaIO3诱导的AMD模型RPE损伤后细胞毒理病理学改变
1.1.5 不同药物浓度的NaIO3诱导的AMD模型形态及功能特点
1.1.6 NaIO3诱导的AMD动物模型的应用
1.1.7 小结
1.2 Müller细胞来源的视网膜前体细胞在药源性视网膜退行性病变中的神经再生和保护作用及机制
1.2.1 前言
1.2.2 NMDA诱导的青光眼模型中Müller细胞介导的神经再生和保护及机制
1.2.3 MNU诱导的RP模型中Müller细胞介导的神经再生及机制
1.2.4 NaIO3诱导的AMD模型Müller细胞介导的神经再生和保护作用及机制
1.2.5 STZ诱导的DR模型Müller细胞介导的神经保护作用及机制
1.2.6 小结与展望
第2章 NaIO3诱导AMD动物模型视网膜组织形态学特征
2.1 实验材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验试剂
2.1.3 主要设备
2.1.4 主要试剂配制
2.2 方法与步骤
2.2.1 实验分组
2.2.2 实验步骤
2.2.3 统计学分析
2.3 实验结果
2.3.1 尾静脉注射前后对大鼠全身的影响
2.3.2 视网膜冰冻切片HE染色结果
2.3.3 视网膜RPE细胞损伤情况
2.3.4 视网膜光感受器细胞凋亡情况
2.3.5 视网膜Müller细胞增殖情况
2.3.6 视网膜Müller细胞去分化情况
2.4 讨论
第3章 大鼠原代BMSCs提取、体外培养及鉴定
3.1 实验材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验试剂
3.1.3 主要试剂配制
3.1.4 主要设备
3.2 方法与步骤
3.2.1 大鼠原代BMSCs提取
3.2.2 BMSCs的培养及传代
3.2.3 BMSCs增殖能力检测
3.2.4 流式细胞术检测大鼠BMSCs表面标志物表达
3.2.5 BMSCs多向分化潜能的鉴定
3.3 结果
3.3.1 BMSCs原代培养
3.3.2 BMSCs生长曲线的绘制
3.3.3 BMSCs的流式细胞仪鉴定
3.3.4 BMSCs多向分化潜能的鉴定
3.4 讨论
第4章 BMSCs调控Müller细胞增殖和去分化的分子机制研究
4.1 实验材料
4.1.1 实验动物及分组
4.1.2 实验试剂
4.1.3 主要设备
4.2 方法与步骤
4.2.1 实验分组
4.2.2 BMSCs视网膜下移植方法
4.2.3 Morris水迷宫实验观察视力变化
4.2.4 视网膜总RNA提取
4.2.5 总RNA逆转录合成cDNA
4.2.6 qPCR检测Tgf-β的变化
4.3 结果
4.3.1 BMSCs对视网膜的保护作用
4.3.2 BMSCs促进视网膜Müller细胞增殖
4.3.3 BMSCs促进视网膜Müller细胞去分化
4.3.4 Morris水迷宫试验检测BMSCs对视功能的保护作用
4.3.5 BMSCs促进视网膜Müller细胞增殖去分化的机制
4.4 讨论
第5章 全文结论
Reference
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢
本文编号：3836729
【文章页数】：110 页
【学位级别】：博士
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中文摘要
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中英文缩略词表
第1章 绪论
1.1 碘酸钠诱导的年龄相关性黄斑变性动物模型研究进展
1.1.1 年龄相关性黄斑变性简介
1.1.2 碘酸钠诱导的AMD模型的建立
1.1.3 NaIO3诱导的AMD模型RPE损伤的机制研究
1.1.4 NaIO3诱导的AMD模型RPE损伤后细胞毒理病理学改变
1.1.5 不同药物浓度的NaIO3诱导的AMD模型形态及功能特点
1.1.6 NaIO3诱导的AMD动物模型的应用
1.1.7 小结
1.2 Müller细胞来源的视网膜前体细胞在药源性视网膜退行性病变中的神经再生和保护作用及机制
1.2.1 前言
1.2.2 NMDA诱导的青光眼模型中Müller细胞介导的神经再生和保护及机制
1.2.3 MNU诱导的RP模型中Müller细胞介导的神经再生及机制
1.2.4 NaIO3诱导的AMD模型Müller细胞介导的神经再生和保护作用及机制
1.2.5 STZ诱导的DR模型Müller细胞介导的神经保护作用及机制
1.2.6 小结与展望
第2章 NaIO3诱导AMD动物模型视网膜组织形态学特征
2.1 实验材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验试剂
2.1.3 主要设备
2.1.4 主要试剂配制
2.2 方法与步骤
2.2.1 实验分组
2.2.2 实验步骤
2.2.3 统计学分析
2.3 实验结果
2.3.1 尾静脉注射前后对大鼠全身的影响
2.3.2 视网膜冰冻切片HE染色结果
2.3.3 视网膜RPE细胞损伤情况
2.3.4 视网膜光感受器细胞凋亡情况
2.3.5 视网膜Müller细胞增殖情况
2.3.6 视网膜Müller细胞去分化情况
2.4 讨论
第3章 大鼠原代BMSCs提取、体外培养及鉴定
3.1 实验材料
3.1.1 实验动物
3.1.2 实验试剂
3.1.3 主要试剂配制
3.1.4 主要设备
3.2 方法与步骤
3.2.1 大鼠原代BMSCs提取
3.2.2 BMSCs的培养及传代
3.2.3 BMSCs增殖能力检测
3.2.4 流式细胞术检测大鼠BMSCs表面标志物表达
3.2.5 BMSCs多向分化潜能的鉴定
3.3 结果
3.3.1 BMSCs原代培养
3.3.2 BMSCs生长曲线的绘制
3.3.3 BMSCs的流式细胞仪鉴定
3.3.4 BMSCs多向分化潜能的鉴定
3.4 讨论
第4章 BMSCs调控Müller细胞增殖和去分化的分子机制研究
4.1 实验材料
4.1.1 实验动物及分组
4.1.2 实验试剂
4.1.3 主要设备
4.2 方法与步骤
4.2.1 实验分组
4.2.2 BMSCs视网膜下移植方法
4.2.3 Morris水迷宫实验观察视力变化
4.2.4 视网膜总RNA提取
4.2.5 总RNA逆转录合成cDNA
4.2.6 qPCR检测Tgf-β的变化
4.3 结果
4.3.1 BMSCs对视网膜的保护作用
4.3.2 BMSCs促进视网膜Müller细胞增殖
4.3.3 BMSCs促进视网膜Müller细胞去分化
4.3.4 Morris水迷宫试验检测BMSCs对视功能的保护作用
4.3.5 BMSCs促进视网膜Müller细胞增殖去分化的机制
4.4 讨论
第5章 全文结论
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作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢
本文编号：3836729
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