小鼠肺组织内质网线粒体结构偶联的分离与鉴定

发布时间：2023-08-18 20:06

　　目的:分离并鉴定C57BL/6小鼠肺组织中内质网线粒体结构偶联(ERMC)。方法:选取8～10周C57BL/6雄性小鼠10只,处死小鼠后,取1 g肺组织匀浆后,采用梯度离心法分别分离出肺组织细胞内的内质网、粗提线粒体、ERMC和纯化线粒体,然后采用Western blotting方法对上述结构进行鉴定。结果:通过梯度离心在离心管中间一层白色条带中含有ERMC,底层白色沉淀物为纯化的线粒体,随后将分离纯化的ERMC和其他组分进行鉴别,结果发现蛋白质二硫键异构酶(PDI)主要表达在内质网和ERMC,Cyto C主要分布在线粒体,而钙连蛋白主要表达在内质网,三磷酸肌醇受体-Ⅰ(IP3R-1)作为内质网上的钙离子通道,在内质网和ERMC均有表达,此外,Sigma-1受体分子伴侣(Sig-1R)多表达在ERMC和线粒体中。结论:上述特征性蛋白分子表达分布特点说明本次研究分离提纯肺组织内ERMC的方法有效,可将其应用于后续的实验。

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 小鼠肺组织内ERMC的分离过程
        1.3.1 组织提取
        1.3.2 ERMC的纯化
    1.4 鉴定提取分离的ERMC
    1.5 统计学方法
2 结果
3 讨论



本文编号：3842860