香草酸抑制血管内皮细胞氧化应激的作用机制研究
发布时间：2023-08-26 03:25
内皮细胞是衬于心血管内壁的单层扁平上皮细胞。高脂膳食引起的过度氧化应激会损害内皮功能,并且被认为是内皮功能障碍重要的致病因素。AMPK作为调节机体能量代谢稳态的关键激酶,是保护内皮功能的重要靶点,可通过调控Nrf2/HO-1、SIRT1/PGC-1α等通路改善氧化应激、调节线粒体功能。大量研究表明通过膳食,特别是花青素,进行早期预防或干预氧化应激对于内皮功能的保护有重要意义。花青素在体内的生物利用度很低,在体内循环的时间及浓度都远不及其代谢产物,因此许多研究者认为花青素所具有的生物功能是其在体内的代谢产物来发挥的。香草酸是花青素在体内的主要代谢产物之一,同时也是一种广泛存在于植物中的酚酸。已有的研究表明,香草酸可以减少血管紧张素Ⅱ刺激导致的HUVECs超氧阴离子增加,增加内皮细胞中HO-1的表达,但没有改变NOX蛋白的表达。因此,香草酸可以通过减少超氧化物的产生来保护内皮细胞,但其对内皮细胞氧化应激的保护作用以及其深层分子机制尚不清楚。本研究以棕榈酸(PA)和香草酸作用内皮细胞,探究香草酸对高脂诱导的内皮细胞氧化损伤的影响及其作用的分子机制。主要研究结果如下:1.在本实验研究条件下,香...
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
1.1 氧化应激研究进展
1.1.1 活性氧的产生
1.1.2 抗氧化系统
1.2 血管内皮细胞氧化应激研究进展
1.2.1 血管内皮细胞的功能
1.2.2 血管内皮细胞氧化损伤与疾病
1.2.3 改善血管内皮细胞氧化损伤的途径
1.3 花青素研究进展
1.3.1 花青素简介
1.3.2 花青素的心血管保护作用
1.3.3 花青素的消化吸收代谢
1.4 香草酸研究进展
1.4.1 香草酸简介
1.4.2 香草酸的生物功能
1.5 本研究的目的与内容
1.5.1 研究目的与意义
1.5.2 研究内容
1.5.3 技术路线
第二章 香草酸改善高脂诱导的内皮细胞氧化应激
2.1 材料与仪器
2.1.1 实验材料
2.1.2 仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 药物配制
2.2.2 HUVECs细胞培养
2.2.3 CCK8 法测定细胞活力
2.2.4 细胞内ROS的测定
2.2.5 细胞内SOD酶活性测定
2.2.6 细胞内CAT酶活性测定
2.2.7 细胞内MDA含量测定
2.2.8 线粒体膜电位检测
2.2.9 数据处理与分析
2.3 结果与分析
2.3.1 香草酸对细胞活性的影响
2.3.2 香草酸对细胞中ROS和 MDA产生的影响
2.3.3 香草酸对细胞线粒体膜电位的影响
2.3.4 香草酸对抗氧化酶SOD和 CAT活性的影响
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 香草酸通过AMPK/Nrf2/HO-1改善内皮细胞氧化应激
3.1 材料与仪器
3.1.1 实验材料
3.1.2 仪器设备
3.2 实验方法
3.2.1 蛋白免疫印迹(Western Blotting)
3.2.2 检测香草酸对AMPK/Nrf2/HO-1活性的影响
3.2.3 检测香草酸对LKB1 活性的影响
3.2.4 检测AMPK抑制剂Compound C对 Nrf2/HO-1的影响
3.2.5 统计学分析
3.3 结果与分析
3.3.1 香草酸对p-LKB1、p-AMPK蛋白表达的影响
3.3.2 香草酸对Nrf2/HO-1 蛋白表达的影响
3.3.3 AMPK抑制剂对Nrf2/HO-1的影响
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 香草酸通过AMPK/SIRT1/PGC-1α改善内皮细胞氧化应激
4.1 材料与仪器
4.1.1 实验材料
4.1.2 仪器设备
4.2 实验方法
4.2.1 检测香草酸对SIRT1和PGC-1α蛋白表达的影响
4.2.2 检测AMPK抑制剂对AMPK、SIRT1和PGC-1α蛋白表达的影响
4.2.3 检测SIRT1 抑制剂对PGC-1 蛋白表达的影响
4.2.4 统计学分析
4.3 结果与分析
4.3.1 香草酸对SIRT1和PGC-1α蛋白表达的影响
4.3.2 AMPK抑制剂对SIRT1和PGC-1α蛋白表达水平的影响
4.3.3 SIRT1抑制剂对PGC-1α蛋白表达水平的影响
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 讨论与结论
5.1 讨论
5.2 结论
5.3 创新点
5.4 展望
参考文献
致谢
作者简介
本文编号：3843857
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
1.1 氧化应激研究进展
1.1.1 活性氧的产生
1.1.2 抗氧化系统
1.2 血管内皮细胞氧化应激研究进展
1.2.1 血管内皮细胞的功能
1.2.2 血管内皮细胞氧化损伤与疾病
1.2.3 改善血管内皮细胞氧化损伤的途径
1.3 花青素研究进展
1.3.1 花青素简介
1.3.2 花青素的心血管保护作用
1.3.3 花青素的消化吸收代谢
1.4 香草酸研究进展
1.4.1 香草酸简介
1.4.2 香草酸的生物功能
1.5 本研究的目的与内容
1.5.1 研究目的与意义
1.5.2 研究内容
1.5.3 技术路线
第二章 香草酸改善高脂诱导的内皮细胞氧化应激
2.1 材料与仪器
2.1.1 实验材料
2.1.2 仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 药物配制
2.2.2 HUVECs细胞培养
2.2.3 CCK8 法测定细胞活力
2.2.4 细胞内ROS的测定
2.2.5 细胞内SOD酶活性测定
2.2.6 细胞内CAT酶活性测定
2.2.7 细胞内MDA含量测定
2.2.8 线粒体膜电位检测
2.2.9 数据处理与分析
2.3 结果与分析
2.3.1 香草酸对细胞活性的影响
2.3.2 香草酸对细胞中ROS和 MDA产生的影响
2.3.3 香草酸对细胞线粒体膜电位的影响
2.3.4 香草酸对抗氧化酶SOD和 CAT活性的影响
2.4 讨论
2.5 小结
第三章 香草酸通过AMPK/Nrf2/HO-1改善内皮细胞氧化应激
3.1 材料与仪器
3.1.1 实验材料
3.1.2 仪器设备
3.2 实验方法
3.2.1 蛋白免疫印迹(Western Blotting)
3.2.2 检测香草酸对AMPK/Nrf2/HO-1活性的影响
3.2.3 检测香草酸对LKB1 活性的影响
3.2.4 检测AMPK抑制剂Compound C对 Nrf2/HO-1的影响
3.2.5 统计学分析
3.3 结果与分析
3.3.1 香草酸对p-LKB1、p-AMPK蛋白表达的影响
3.3.2 香草酸对Nrf2/HO-1 蛋白表达的影响
3.3.3 AMPK抑制剂对Nrf2/HO-1的影响
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 香草酸通过AMPK/SIRT1/PGC-1α改善内皮细胞氧化应激
4.1 材料与仪器
4.1.1 实验材料
4.1.2 仪器设备
4.2 实验方法
4.2.1 检测香草酸对SIRT1和PGC-1α蛋白表达的影响
4.2.2 检测AMPK抑制剂对AMPK、SIRT1和PGC-1α蛋白表达的影响
4.2.3 检测SIRT1 抑制剂对PGC-1 蛋白表达的影响
4.2.4 统计学分析
4.3 结果与分析
4.3.1 香草酸对SIRT1和PGC-1α蛋白表达的影响
4.3.2 AMPK抑制剂对SIRT1和PGC-1α蛋白表达水平的影响
4.3.3 SIRT1抑制剂对PGC-1α蛋白表达水平的影响
4.4 讨论
4.5 小结
第五章 讨论与结论
5.1 讨论
5.2 结论
5.3 创新点
5.4 展望
参考文献
致谢
作者简介
本文编号：3843857
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/3843857.html
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