耻垢分枝杆菌新型毒素-抗毒素系统MSMEG 3 435-3436基因功能的初步研究

发布时间：2023-08-29 22:18

　　目的初步探讨耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统基因的功能及其在细菌药物耐受中的作用。方法利用无水四环素(ATc)诱导穿梭质粒构建毒素基因(MSMEG₃436和MSMEG₆760)表达系统,检测毒素基因表达的抑菌作用。应用CRISPR-Cas12a基因编辑技术构建△MSMEG₃435-3436和△MSMEG₆762-6760敲除菌株,探究毒素-抗毒素系统对菌株生长的影响。通过计算菌株存活率检测MSMEG₃435-3436基因对异烟肼(96μg/ml)和利福平(40μg/ml)的耐受相关性。在耻垢分枝杆菌中用LacZ报告基因分别替换毒素-抗毒素基因(MSMEG₁277-1278、MSMEG₁283-1284、MSMEG₃435-3436、MSMEG₄447-4448和MSMEG₅635-56...

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
材料和方法
    一、材料来源
    二、主要试剂和仪器
    三、研究方法
    四、统计学处理
结果
    一、耻垢分枝杆菌中毒素-抗毒素系统的鉴定及功能检测
    二、敲除菌株生存能力鉴定及抗生素胁迫
    三、LacZ融合转录调控及启动子活性检测
讨论



本文编号：3844392