基于寨卡病毒复制子的抗病毒药物筛选系统(英文)

发布时间：2023-11-28 19:49

　　寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)是引起成人格林巴利综合征(Guillain-Barre syndrome, GBS)以及胎儿和新生儿小头畸形疾病的重要病原体。有效的抗病毒药物筛选系统是防治ZIKV感染的有效工具。本研究构建了以海肾荧光素酶为检测靶标的寨卡病毒复制子Rluc-ZIKV-Rep,并通过突变NS5蛋白,构建了非复制型寨卡病毒复制子Rluc-ZIKV-Rep NS5△GDD。为了检测复制子的功能,将两种复制子转化至Vero细胞,结果显示随着时间延长, Rluc-ZIKV-Rep荧光素酶活性逐渐增加,寨卡病毒m RNA拷贝数逐渐增多,证明以海肾荧光素酶为检测靶标的寨卡病毒复制子构建成功。为了检测该系统是否能够用于抗病毒药物筛选,用马尼地平和西尼地平两种抗寨卡病毒的药物进行检测,结果显示Rluc-ZIKV-Rep的复制能力随着药物浓度的增加而逐渐降低,呈现一种剂量依赖的方式,说明该系统可以用于抗病毒药物的筛选。综上所述,本研究构建了一种可以用于抗病毒药物筛选的寨卡病毒复制子,为筛选有效的抗病毒药物提供了有力工具。

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【文章目录】：
1 Materials and methods
    1.1 Cells and antiviral drugs
    1.2 Plasmid construction
    1.3 Luciferase assay
    1.4 Reverse transcription quantitative PCR(RT-qPCR)
    1.5 Rluc-ZIKV-Rep inhibition assay
    1.6 Statistical analysis
2 Results
    2.1 Construction of the Rluc-ZIKV-Rep
    2.2 Rluc-ZIKV-Rep can transfect and repli-cate in Vero cells
    2.3 Validation of Rluc-ZIKV-Rep based as-says for screening antivirals
3 Discussion



本文编号：3868825