SIRT3激动剂对乙肝病毒转录和复制的影响

发布时间：2024-01-14 09:05

　　该文探讨了SIRT3激动剂(Honokiol,HKL)对乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)转录和复制的影响。培养HepG2-NTCP和人原代肝细胞(primary human hepatocytes,PHH),感染HBV颗粒后,用Honokiol(5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L)处理细胞后继续培养10天,通过荧光定量PCR检测细胞内HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs水平,Southern blot实验进一步检测胞内HBV DNA水平。构建SIRT3-KO细胞,检测敲除SIRT3后,Honokiol对细胞内HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs的影响。通过小鼠尾静脉高压注射pCMV-KRAB-Cre质粒和precccDNA质粒构建持续感染小鼠模型,一周后腹腔注射Honokiol持续20天。荧光定量PCR检测小鼠血清中HBV DNA拷贝数,肝组织内HBV DNA、cccDNA和HBV RNAs水平。结果表明,Honokiol浓度依赖性地抑制HepG2-NTCP和PHH细胞内HBV DNA以及HBV RNAs水平,此外,Hon...

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 HBV DNA的提取及Southern blot实验
        1.2.3 血清及肝组织HBV DNA的提取
        1.2.4 Hirt法提取HBV cccDNA
        1.2.5 荧光定量PCR
        1.2.6 MTT实验
        1.2.7 Western blot实验
        1.2.8 动物实验
        1.2.9 统计学分析
2 结果
    2.1 HKL对HepG2-NTCP和PHH细胞毒性的影响
    2.2 HKL对HepG2-NTCP和PHH细胞HBV DNA水平的影响
    2.3 HKL对HepG2-NTCP和PHH细胞HBV RNAs水平的影响
    2.4 HKL对HepG2-NTCP和PHH细胞HBV cccDNA水平及转录活性的影响
    2.5 HKL抑制HBV复制和转录与SIRT3相关
    2.6 在HBV持续感染小鼠模型中验证HKL的抗病毒作用
3 讨论



本文编号：3877960