基于流式细胞术的大鼠骨髓网织红细胞微核实验方法的建立
发布时间:2024-03-12 05:40
目的建立并验证大鼠骨髓网织红细胞(reticulocytes,RETs)微核的流式细胞术检测方法。方法选用CD71-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记骨髓网织红细胞,CD45-藻红蛋白(phycoerythrin,PE)标记白细胞,核酸染料DRAQ5标记DNA,建立骨髓微核的流式细胞术检测方法。SD大鼠随机分为甲基磺酸乙酯(ethyl methanesulfonate,EMS)、环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)、N-乙基-N-亚硝基脲(ethyl nitrosourea,ENU)和秋水仙素(colchicine,COL)染毒组,各组大鼠按染毒剂量不同再分为4亚组,每亚组5只。以染毒剂量为0,作为各组溶剂对照。染毒方案为间隔24 h两次经口给药。末次给药后24 h采集双侧股骨骨髓,采用本研究建立的基于流式细胞术的骨髓微核检测方法测定骨髓中的RETs微核率和RETs比例,并同时使用人工显微镜下计数方法进行检测。结果成功建立基于流式细胞术的骨髓微核检测方法。采用该方法检测20只溶剂对照大鼠骨髓微核率(背景微核率)为0.83‰...
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本文编号:3926625
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